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microtubule抑制劑(Ansamitocin P-3)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 15:31:36瀏覽次數:201次

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貨號 FS-X10885
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human phospho-inhibitory subunit of NF-κB Alpha,pIKB Alpha ELISA kit 人化核因子κB抑制蛋白α(IKKα human

產品介紹:

Ansamitocin P-3是一種微管(microtubule)抑制劑。Ansamitocin P-3是一種大環抗腫瘤抗生素。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:66584-72-3

別名:Antibiotic C 15003P3;Maytansinol butyrate;C15003P3

純度:98.0%

分子量:635.14

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:microtubule抑制劑(Ansamitocin P-3)

英文名稱:Ansamitocin P-3

產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10885

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

棘殼孢屬人EJ抗體/抗甘酰tRNA合成抗體Anti-SLC27A5 Antibody人補體片斷5b(C5b)

異常威克漢姆酵母人低密度脂蛋白免疫復合物Anti-SLC26A3 Antibody重鏈(IgH)

大豆慢生根瘤菌小鼠膽囊收縮/腸促胰肽Anti-SLC27A5 Antibody重鏈(IgH)

短短小芽胞桿菌大鼠17羥皮質類固Anti-SLC28A2 Antibody重鏈可變區(IgHV)

埋藏曲霉小鼠腦腸肽Anti-SLC28A2 Antibody重鏈可變區(IgHV)

金龜子綠僵菌(可訂)人抗增殖核抗原抗體Anti-SLC30A9 Antibody人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)

芽孢桿菌屬大鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖Anti-SLC34A2 Antibody人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)

Frondihabitans大鼠17-類固Anti-SLC2A3 Antibody人血紅蛋白晚期糖基化終末產物(Hb-AGE)

枯草芽孢桿菌人抗IgE受體抗體Anti-SLC38A2 Antibody人血紅蛋白晚期糖基化終末產物(Hb-AGE)

摩氏摩根菌小鼠6前列腺Anti-SLC39A1 Antibody人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)

葡萄座腔菌大鼠白介2可溶性受體α鏈Anti-SLC39A2 Antibody人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)

華根霉人抗IVIgG抗體Anti-SLC39A7 Antibodyj鏈(Ig-j)

乙假絲酵母小鼠載脂蛋白A1Anti-SLC39A7 Antibodyj鏈(Ig-j)

水生拉恩氏菌大鼠白介2可溶性受體β鏈Anti-SLC43A1 Antibody人血紅蛋白β亞基(HB-β)

根瘤菌人抗心肌抗體Anti-SLC3A2 Antibody人血紅蛋白β亞基(HB-β)

解蛋白弧菌小鼠載脂蛋白B0Anti-SLC39A9 Antibody人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)

腫瘤蛋白D53抗體短裙竹蓀1-2ETMcAb3A7

血栓B2抗體一種新發現的抑癌基因玉大斑病菌5G9AE3

新型抑癌基因抗體桑黃D3-D3

環指蛋白5抗體柑橘綠霉病TBEA8
microtubule抑制劑(Ansamitocin P-3)釀酒酵母 鋰、鈉/Li, Na/2.0µg/ml ;、氨/K, NH3/200µg/ml粘蛋白5AC

草青霉 銅、錳、鋅/Cu, Mn, Zn/0µg/ml ;鐵/Fe/500µg/ml血小板糖蛋白V

雞傷門氏 鎘、鋅/Cd, Zn/µg/ml ;銅/Cu/50µg/ml ;鉛/Pb/0µg/ml骨形成蛋白2

解脂亞羅酵母 砷、鎘、鉛/As, Cd, Pb/µg/ml ;錳/ Mn/0µg/ml肌鈣蛋白I

立枯絲核 鉻/Cr/0.5µg/ml ;釩、鋯/V, Zr/1.0µg/ml ;鋁、鈦/Al, Ti/µg肌鈣蛋白T

大腸埃希氏 鈣、、鎂、鈉/Ca, K, Mg, Na/5µg/ml ;鋁、鐵、鋅/Al, Fe, Zn/µ谷氨酰合成

枯草芽孢桿 銅、錳、鋅/Cu, Mn, Zn/0µg/ml ;鐵/Fe /500µg/ml ;、鈣、鈉、鎂X

硫色鐮刀 鋇、銅、錳/Ba, Cu, Mn/5µg/ml ;鋰、硒、鋅/Li, Se, Zn/µg/mlⅨ

蛋白原乳桿 鎘、鉻、硒/Cd, Cr, Se/1µg/ml ;砷、銅、錳、鎳、錢/As, Cu, Mn, Ni,性鞘磷脂

哈茨木霉 鋁、砷、鋇、鎘、鈷、鉻、銅、錳、鉬、鎳、鉛、硒、鍶、鋅/Al, As, Ba, Cd, Co, Cr玉赤霉烯酮

棲藻海卵 砷、鋇、鎘、鉻、銅、鐵、鎂、錳、鎳、鋅/As, Ba, Cd, Cr, Cu, Fe, Mg, Mn觸珠蛋白

楊盤二孢* 鋁、砷、、鋇、鈹、鎘、鈷、鉻、銅、錳、鉬、鈉、鎳、鉛、銻、硒、錫、鈦、、釩、鋅、鋯/Al, As過氧化氫

蟹味菇(白) 鋁、砷、、鋇、鈹、鎘、鈷、鉻、銅、錳、鉬、鈉、鎳、鉛、銻、硒、錫、鈦、、釩、鋅、鋯/Al, AsIII型前膠原

枯草芽孢桿 鋇、鍶、/Ba, Sr, Tl /50µg/ml ;鋁、砷、、鈹、鉍、鈣、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、IV型膠原

大腸桿 鋇/Ba/1600µg/ml ;鍶/Sr/600µg/ml ;鈣/Ca/400µg/ml ;鎂/Mg羥脯

 


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