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廣譜Aurora激酶抑制劑(AMG 900)

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品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-20 16:31:48瀏覽次數(shù):204次

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貨號 FS-X10674
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TSLP(Ret) 大

產(chǎn)品介紹:

AMG900是一種有效的選擇性的廣譜Aurora激酶抑制劑,作用于Aurora A,B和C,IC50分別為5nM,4nM和1nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:945595-80-2

純度:99.30%

分子量:503.58

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

中文名稱:廣譜Aurora激酶抑制劑(AMG 900)

英文名稱:AMG 900

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10674

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

枯草芽孢桿菌蛋白激B(抗原)Anti-ALB Antibody半乳凝1(GAL1)

白磷蘑菇癌相關(guān)抗原Anti-AKT1S1 Antibody半胱酰白三烯受體2(CYSLTR2)

枯草芽孢桿菌間變型淋巴瘤激(抗原)Anti-ALCAM Antibody半胱酰白三烯受體1(CYSLTR1)

釀酒酵母5-羥色Anti-ALDH1L1 Antibody半胱甘豐富蛋白1(CSRP1)

Microbacterium flavum5-羥色受體1A(多肽)Anti-ALDH3A1 Antibody半胱豐富血管生成誘導(dǎo)因子61(CYR61)

哈茨木霉膜粘連蛋白A3抗體Anti-ALDOA Antibody半胱豐富跨膜BMP調(diào)節(jié)因子1(CRIM1)

產(chǎn)紫青霉金屬蛋白組織抑制因子-2(抗原)Anti-ALDOA Antibody半胱豐富分泌蛋白3(CRISP3)

腸膜明串珠菌金屬蛋白組織抑制因子(抗原)Anti-ALDOB Antibody半胱豐富蛋白1(CRIP1)

歧異假絲酵母胰島原Anti-ALDOC Antibody半胱蛋白抑制劑B(CSTB)

焦土鏈霉菌腎上腺髓質(zhì)受體(抗原)Anti-ALG6 Antibody半胱蛋白抑制劑A(CSTA)

秦氏蜜環(huán)菌纖溶原激活物抑制因子Anti-Alpha Internexin INA Intermediate Neurofilament Antibody半胱蛋白抑制劑9(CST9)

Sphingopyxis baekryungensis角蛋白7Anti-ALPK1 Antibody半胱蛋白抑制劑8(CST8)

赭曲霉異硫熒光(FITC)標(biāo)記糖尿病相關(guān)肽1-37Anti-ALPK2 Antibody半胱蛋白抑制劑7(CST7)

巴氏醋桿菌(現(xiàn)1)凋亡蛋白活性因子-1(抗原)Anti-ALPP Antibody半胱蛋白抑制劑6(CST6)

Acinetobacter chengduensis凋亡蛋白活性因子-1(抗原)Anti-ALPL Antibody半胱蛋白抑制劑5(CST5)

植物乳桿菌雄激受體(多肽抗原)Anti-ALX3 Antibody半胱蛋白抑制劑4(CST4)

磷二酯7抗體解脂假絲酵母大鼠胎兒真皮組織提取物

磷二酯7B抗體平滑假絲酵母大鼠視網(wǎng)膜組織提取物

先天性眼外肌纖維化相關(guān)蛋白FEOM2抗體埃切畢赤酵母大鼠晶狀體組織提取物

神經(jīng)母細(xì)胞瘤蛋白PHOX2B抗體白色假絲酵母(白色念珠菌)大鼠脈絡(luò)膜組織提取物
廣譜Aurora激酶抑制劑(AMG 900)曲霉 4-戊烯-1-趨化樣因子MARVEL跨膜結(jié)構(gòu)域包含5

??伎耸?/span> 1-辛炔-3-趨化樣因子MARVEL跨膜結(jié)構(gòu)域包含4

構(gòu)巢曲霉 烯羥乙酯狂犬病

側(cè)耳 4-甲基-2-氧戊魏氏梭

指狀青霉 3,4,9,10-苝四甲酰二亞弓形蟲IgG抗體

短雙歧桿 (三氟甲基)基硅烷活性氧

金針菇 (三氟甲基)基硅烷組織蛋白B

Lysobacter daejeonensis 去氫膽組織蛋白D

拉雷斯戈麥斯氏隱球酵母 普伐他汀鈣離子

大腸埃希氏 4,4'-二溴三苯白介13

瓦爾肯葉 糖精轉(zhuǎn)化生長因子β

中瀨畢赤酵母 4-甲基-5-甲基-1,3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮口蹄疫抗凝抗體

杏鮑菇 3-[(基硅基)乙炔基]吡啶溶

秦氏蜜環(huán) 2-溴丁魏氏梭(D型)

皺褶青霉 四甲基硫氫魏氏梭(C型)

 


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