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貨號 | FS-X10478 |
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產品介紹:
英文名稱:Cryptotanshinone 產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg Cryptotanshinone是一種有效的STAT3抑制劑,IC50值為4.6μM,在前列腺癌細胞DU145中,抑制STAT3Tyr705磷酸化作用。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:35825-57-1 別名:Cryptotanshinon;Tanshinone c 純度:98.51% 分子量:296.36 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:STAT3抑制劑(Cryptotanshinone)
英文名稱:Cryptotanshinone
產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg
貨號:FS-X10478
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
矩圓黑盤孢視黃結合蛋白1抗體Anti-EPHA3 Antibody胰島樣生長因子不穩定亞基(IGFALS)
嗜麥芽糖寡養單胞菌視網膜母瘤結合蛋白6抗體Anti-EPHA5 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白7(IGFBP7)
枯斑擬盤多毛孢核糖體結合蛋白1抗體Anti-EPHB2 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白6(IGFBP6)
地衣芽胞桿菌核糖體蛋白L5抗體Anti-EPHB1 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白5(IGFBP5)
環發仙菌磷化RNA聚合II CTD抗體Anti-EPHB3 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白4(IGFBP4)
擬無枝菌菌磷化RNA聚合II CTD抗體Anti-EPHX2 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)
產黃青霉血管生成核糖核4抗體(肌性側索硬化癥蛋白)Anti-EPHB3 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白1(IGFBP1)
費氏中華根瘤菌核糖體蛋白L19抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子2受體(IGF2R)
聚多曲霉Ras樣蛋白家族10A抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子2-mRNA結合蛋白3(IGF2BP3)
維氏氣單胞菌Ras相關區域家族蛋白4抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子2(IGF2)
塔賓曲霉RNA尿合結構域蛋白2抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子1受體(IGF1R)
發酵性酵母環指蛋白14抗體Anti-EPOR Antibody胰島樣生長因子1(IGF1)
淺綠黃鏈霉菌鳥核交換因子抗體Anti-EPOR Antibody胰島樣蛋白5(INSL5)
紅緣擬層孔菌核糖體結合因子RBFA抗體Anti-EPOR Antibody胰島樣蛋白3(INSL3)
煙曲霉環指蛋白166抗體Anti-Epsilon-sarcoglycan(SGCE) Antibody胰島受體(ISR)
煙色離褶傘視網膜色變性蛋白1抗體Anti-EPS15 AntibodyX3(TRYX3)
福氏志賀氏菌Shigella│flexneri 質量規格:0.985
大腸埃希氏菌DH5a/pET20b/PasecAEscherichia│coli 質量規格:0.98
嗜鹽潮間帶桿菌Aestuariibacter│halophilus 質量規格:98%,BR
STAT3抑制劑(Cryptotanshinone)乳桿屬 三(3,5-二叔丁基-4-羥芐基)異脲酯α平滑肌肌動蛋白抗體
絨毛青霉 二甲基十八烷基[3-氧基硅基]化番茄紅
柄桿 5-噻吩-2-磺酰尿
尖孢鐮刀 BOC-L-絲甲酯三磷腺受體
生癌腸桿 矢車菊半乳糖肉堿棕櫚酰轉移II
大腸桿 2,4-二-6,7-二甲氧基喹唑啉CD133分子
白僵 (±)-哌-2-羧B瘤-X
土曲霉金色變種 1-芐基哌B瘤-W
地衣芽孢桿 替洛隆雄酮
嗜鹽動性球 2-溴乙基基溴化可溶性補體受體
三葉草根瘤 4-羥基-8-甲氧基喹啉-3-羧乙酯雄甾酮
木賊鐮孢 1,3-二甲基-5-吡唑酮雌三
麥根腐平臍蠕孢 2-甲氧基-4-氨基甲酯卵清蛋白
平菇(南京1號) L-氨基琥珀脫氫
青霉 1-(4,4'-二氟苯甲基)哌轉化生長因子β受體1
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