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PARP抑制劑(AZD-2461)

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 16:31:22瀏覽次數:215次

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貨號 FS-X11001
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Flt3(Mouse FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 小鼠FMS樣酪氨激3鈷,四水 99.999% metals basis
IGFBP-1(Mouse Insulin-like

中文名稱:PARP抑制劑(AZD-2461)

英文名稱:AZD-2461

產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X11001

產品介紹:

AZD2461是新型PARP抑制劑,能夠避免由Pgp介導的olaparib抗性。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:1174043-16-3

純度:98.12%

分子量:395.43

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

暗孢小克銀漢霉Escherichia sp.大鼠中性粒明膠相關脂質運載蛋白(NGAL)

痤瘡桿菌Escherichia sp.大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)

孟氏假單胞菌Escherichia sp.大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)

釀酒酵母Escherichia sp.大鼠雌激受體(ER)

檬果炭疽病菌Escherichia sp.大鼠雌激受體(ER)

淺黃隱球酵母Escherichia sp.大鼠β-防御(β-DF)

結腸彎曲菌Escherichia sp.大鼠β-防御(β-DF)

奈良鏈霉菌Escherichia sp.大鼠多巴D1受體(D1R)

大腸埃希氏桿菌Escherichia sp.大鼠多巴D1受體(D1R)

柱孢綠僵菌Escherichia sp.大鼠腎上腺能a1A受體(ADRA1A)

西方伊薩酵母Escherichia sp.大鼠腎上腺能a1A受體(ADRA1A)

金黃殼囊孢菌Escherichia sp.大鼠鈣結合蛋白(CR)

紅曲紅曲Escherichia sp.大鼠鈣結合蛋白(CR)

鹽反硝化枝芽孢桿菌Escherichia vulneris大鼠透明質結合蛋白(HABP)

匍匐曲霉原變種Escherichia coli大鼠透明質結合蛋白(HABP)

大豆慢生根瘤菌Escherichia coli大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)

胞質分裂調控蛋白1抗體貪噬菌屬雞胚成纖維細胞(自發轉化)

磷脂酰肌激PI3Kβ抗體適宜中華根瘤菌人SV40轉染成骨細胞

原鈣粘附蛋白12/血管內皮鈣粘蛋白2抗體皮奧利亞類芽孢桿菌科研干細胞

腫瘤抑制基因p53抗體內生固氮菌大鼠肝干細胞
PARP抑制劑(AZD-2461)紫色直絲鏈霉 五脂酮C

枯草芽孢桿 聚乙二2000

Parasphingopyxis lamellibrachiae 五脂酮A

釀酒酵母 南五味子木脂L

銳齒櫟蛙眼 聚乙二1500

乙型副傷門 肥牛木

暗黑微綠鏈霉 聚乙二00

食氫袋狀* 戈辛F

寬圓羊肚 戈辛S

產氣莢膜梭 A型 聚乙二800

蘇云金芽孢桿達可他亞種 五味子酯

異色擬盤多毛孢 聚乙二600

泡盛曲霉 龍膽黃堿

產堿假單胞 印度榅桲

玉蜀黍平臍蠕孢 聚乙二400

 


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