產(chǎn)品介紹:

中文名稱：可逆FAK和Pyk2激酶抑制劑(PF-562271)

英文名稱：PF-562271

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

貨號(hào)：FS-X10928

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

阿穆爾斯克灣鹽地桿菌人α淀粉Bacillus cereus小鼠血管生成4(ANG-4)

黑腐皮殼菌人堿性磷Bacillus cereus小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)

核黃氧化德沃斯氏菌人天青殺Bacillus cereus小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)

蕈狀芽孢桿菌人血管緊張肽ABacillus cereus小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)

膠紅酵母人胰淀粉Bacillus cereus小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)

牛輪狀病（可訂購(gòu)）人α烯化Bacillus cereus小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)

蠟狀芽孢桿菌人膠原IIBacillus cereus小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)

冷海水黃桿菌人膠原IBacillus cereus小鼠CD30分子(CD30)

短芽孢桿菌人磷化蛋白激CBacillus cereus小鼠CD30分子(CD30)

毛殼人磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激Bacillus cereus小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ

黑曲霉人乙酰酯Bacillus cereus小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ

Brevibacillus parabrevis人葡萄糖氧化Bacillus cereus小鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)

克魯斯假絲酵母人酪羥化Bacillus cereus小鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)

紅托竹蓀人多巴脫羧Bacillus cereus小鼠嗜粒趨化因子(ECF)

硬結(jié)節(jié)桿菌人非神經(jīng)元性烯化Bacillus cereus小鼠嗜粒趨化因子(ECF)

伯克霍爾德氏菌人多巴-β羥化Bacillus cereus小鼠嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)

WD重復(fù)蛋白16抗體蠶蛹1號(hào)小鼠肝細(xì)胞AML12（干細(xì)胞庫(kù)保藏）

WW結(jié)構(gòu)域E3泛連接1抗體平菇2000（京瑞）大耳山羊肺細(xì)胞

乙型肝炎X相關(guān)蛋白2抗體PL20（雙抗黑平）正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞

X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白4抗體嗜熱側(cè)孢霉昆蟲細(xì)胞
可逆FAK和Pyk2激酶抑制劑(PF-562271)費(fèi)比恩塞伯林德納氏酵母 二烯基二硫二酰

綠粘帚霉 三縮四乙二過氧化物體增殖物激活受體α

枯草芽胞桿 甲基烯羥乙酯過氧化物體增殖物激活受體β

簇生黃韌傘 鄰乙氧基苯甲酰腺活化蛋白激

尖孢鐮刀 對(duì)甲苯磺甲酯乙酰羧化

豇豆慢生根瘤 十四氨酰磷合成I

延長(zhǎng)赤擔(dān)孢酵母 三叔丁色氧化

球孢毛殼 3-乙酰吡啶延胡索還原

哈茨木霉 2-乙酰吡啶酮

緊縮花褶傘 2,4,6-三溴乳脫氫

敵鼠鈉鹽速測(cè)包 甲合次硫氫鈉琥珀脫氫

堆形艾美耳球蟲 亞硝鈷鈉異檸檬脫氫

向日葵殼針孢 鉻鈉6-磷葡萄糖脫氫

薩赫里劍 次亞磷鈉生長(zhǎng)

彎孢 化鍶補(bǔ)體蛋白3