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Hoechst 33342細胞藍色熒光染料

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-09 11:03:52瀏覽次數:190次

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貨號 FS-X9553
Hoechst 33342細胞藍色熒光染料正在熱銷的產品:脂肪suan合成mei(FAS)測試盒 規格:100管/96樣 測試方法:微量法
脂肪suan合成mei(FAS)測試盒 規格:10管/9樣 測試方法:紫外分光光度法
脂肪suan合成mei(FAS)測試盒 規格:25管/24樣 測試方法:紫外分光光度法
脂肪suan合成mei(FAS)測試盒 規格:50管/48樣 測試方法:紫外分

中文名稱:Hoechst 33342細胞藍色熒光染料

英文名稱:Hoechst 33342

產品規格:10mg

貨號:FS-X9553

產品介紹:

本Hoechst 33342是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。

Hoechst 33342染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33342也常用于普通的細胞核染色,或常規的DNA染色。

Hoechst 33342的大激發波長為346nm,大發射波長為460nm;Hoechst 33342和雙鏈DNA結合后,大激發波長為350nm,大發射波長為461nm。

Hoechst 33342溶于水,溶解度可達20mg/ml。用于細胞核染色時,推薦的Hoechst 33342工作濃度為0.5-10μg/ml。

:23491-52-3

分子式:C27H28N6O·3HCl·3H2O

分子量:615.99

儲存條件:-20℃避光,有效期一年。

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

基質細胞衍生因子2(SDF2)檢測試劑盒  forStromalCellDerivedFactor2(SDF2)    

蛛毒su受體2(LPHN2)檢測試劑盒  forLatrophilin2(LPHN2)    

促腎上腺皮質激su樣中葉肽(CLIP)檢測試劑盒  forCorticotropinLikeIntermediateLobePeptide(CLIP) 抗核膜糖蛋白210抗體(AGPA)檢測試劑盒  forAnti-Glycoprotein210Antibody(AGPA)    

胰島su受體(ISR)檢測試劑盒  forInsulinReceptor(ISR)    

/葡萄糖協同轉運蛋白1(SGLT1)檢測試劑盒  forSodium/GlucoseCotransporter1(SGLT1)    

整合suβ2(ITGβ2)檢測試劑盒  forIntegrinBeta2(ITGb2)    

Toll樣受體4(TLR4)檢測試劑盒  forTollLikeReceptor4(TLR4)    

鳥氨suan脫羧mei抗mei1(OAZ1)檢測試劑盒  forOrnithineDecarboxylaseAntizyme1(OAZ1)    

二氫乳清suan脫氫mei(DHODH)檢測試劑盒  forDihydroorotateDehydrogenase(DHODH)    

絲氨suan蛋白mei31(PRSS31)檢測試劑盒  forProtease,Serine31(PRSS31)    

mei1(PON1)檢測試劑盒  forParaoxonase1(PON1)    

性鞘磷脂磷suan二酯mei(Alk-Smase)檢測試劑盒  forAlkalineSphingomyelinase(Alk-Smase)    

分泌型卷曲相關蛋白1(SFRP1)檢測試劑盒  forSecretedFrizzledRelatedProtein1(SFRP1)    

Genethonin1蛋白(GEN1)檢測試劑盒  forGenethonin1(GEN1)    

葡萄糖suanmeiβ(GUSβ)檢測試劑盒  forGlucuronidaseBeta(GUSb)    

羧肽meiA3(CPA3)檢測試劑盒  forCarboxypeptidaseA3,MastCell(CPA3)    
Hoechst 33342細胞藍色熒光染料辛伐他標準品  規格:200mg  英文名稱:Simvastatin

lv雷他定標準品  規格:200mg  英文名稱:Loratadine

左旋jia炔諾tong標準品  規格:200mg  英文名稱:Levonorgestrel

suan舍曲林外消旋混合物標準品  規格:25mg  英文名稱:

suan舍曲林標準品  規格:100mg  英文名稱:Sertraline Hydrochloride

suan左卡巴斯汀標準品  規格:50mg  英文名稱:Levocabastine Hydrochloride

克肟標準品  規格:500mg  英文名稱:Cefixime

地尼相關物質B標準品  規格:10mg  英文名稱:

suanjia酯標準品  規格:1.2ml×3ampules  英文名稱:Methyl Acetate

奧利si他相關物質C標準品  規格:25mg  英文名稱:

 


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