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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶抑制劑(AZD-7762)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-18 15:16:58瀏覽次數(shù):209次

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貨號(hào) FS-X10511
細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶抑制劑(AZD-7762)正在熱銷的產(chǎn)品:TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2) 膠質(zhì)系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(多肽)4-香豆 98%
TNF-Alpha(Tumor Necrosis Factor-Alpha) 人腫瘤壞死因子-α(多肽抗原)4-香豆 ,≥99%
TRA16 (Testicular orphan nuclear rece

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:checkpoint kinase inhibitor

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

AZD-7762是一種有效的ATP競(jìng)爭(zhēng)性的細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶(checkpoint kinase,Chk)抑制劑,抑制Chk1,IC50為5nM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號(hào):860352-01-8

純度:98.68%

分子式:C??H??FN?O?S

分子量:362.42

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

中文名稱:細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶抑制劑(AZD-7762)

英文名稱:checkpoint kinase inhibitor

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào):FS-X10511

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

多帶革孔菌跨膜蛋白16A/鈣激活離子通道抗體Anti-HSD17B1 Antibody唾液轉(zhuǎn)移8D(SIAT8D)

卡爾斯伯酵母腫瘤壞死因子-α抗體Anti-HSD17B10 Antibody唾液轉(zhuǎn)移8C(SIAT8C)

紋黑蛋巢菌腫瘤蛋白P53誘導(dǎo)蛋白11抗體Anti-HSD17B1 Antibody唾液轉(zhuǎn)移8B(SIAT8B)

葡萄球菌屬味覺2型受體蛋白家族49抗體Anti-HSD17B2 Antibody唾液轉(zhuǎn)移8(SIAT8)

糞腸球菌早期未分化視網(wǎng)膜及晶狀體蛋白EURL抗體Anti-HSD17B2 Antibody唾液轉(zhuǎn)移7F(SIAT7F)

勝利油田鹽單胞菌特異激底物蛋白抗體Anti-HSD17B4 Antibody唾液轉(zhuǎn)移7E(SIAT7E)

脊孢糖多孢菌微管相關(guān)同源蛋白TPX2抗體Anti-HSD17B4 Antibody唾液轉(zhuǎn)移7D(SIAT7D)

毛栓菌神經(jīng)死亡誘導(dǎo)蛋白激抗體Anti-HSD17B6 Antibody唾液轉(zhuǎn)移7C(SIAT7C)

秦氏蜜環(huán)菌微管蛋白β tubulin抗體 Tubulin βAnti-HSF1 Antibody唾液轉(zhuǎn)移7B(SIAT7B)

草生毛霉轉(zhuǎn)化性卷曲含蛋白質(zhì)2Anti-HSD3B1 Antibody唾液轉(zhuǎn)移7A(SIAT7A)

芽孢桿菌屬小鼠抗促甲狀腺抗體Anti-HSF2 Antibody唾液轉(zhuǎn)移4C(SIAT4C)

龍舌蘭盤孢腦源性tau蛋白激抗體Anti-HSF2 Antibody唾液轉(zhuǎn)移4B(SIAT4B)

鏈孢囊菌破傷風(fēng)重鏈抗體Anti-HSF4 Antibody唾液轉(zhuǎn)移4A(SIAT4A)

黑曲霉基移換樣蛋白1抗體Anti-Hsp70/HSPA1A/HSPA1B Antibody唾液轉(zhuǎn)移1(SIAT1)

玫瑰暗黃鏈霉菌膜型絲蛋白2抗體Anti-HSP90AA1 Antibody唾液乙酰酯(SIAE)

地中海中慢生根瘤菌*抑癌蛋白TCHP抗體Anti-HSP90AA1 Antibody唾液4(SIAL4)

跨膜蛋白SEMA4F抗體異常漢遜酵母異常變種人脈絡(luò)膜血管平滑肌細(xì)胞

跨膜蛋白SEMA4G抗體異常威克漢姆酵母人晶狀體上皮細(xì)胞

軸突導(dǎo)向因子SEMA3E抗體死亡谷芽孢桿菌人視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞

跨膜蛋白SEMA5A抗體梭狀芽孢桿菌人胎兒真皮成纖維細(xì)胞
細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶抑制劑(AZD-7762)運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢 D-半乳糖烯痘病

赤褐鵝膏 2-乙酰基-6-甲氧基吡啶B病

食用油   B 1  異噁唑-5-甲逆轉(zhuǎn)錄病

樟疫霉 FMOC-L-2-缺陷病

桔梅奇酵母 FMOC-L-3-T趨向性病1型

蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 L-谷-15N尿

產(chǎn)氣莢膜梭 C型 脒基硫脲結(jié)核

熒光假單胞 1,5-萘二磺,四水肌鈣蛋白T

嗜松青霉 3-溴聯(lián)苯心肌特異性肌鈣蛋白T

短小芽孢桿 2-聯(lián)苯牛血清白蛋白

鍺栓孔 二乙基二硫代白介18

粗糙脈孢 α-羥基異丁甲酯B皰疹病抗體

毛球馬勃屬 4-(Boc-氨基)-3-吡啶B皰疹病抗原

蠟狀芽孢桿 4-三氟甲硫基芐溴胰高血糖

宇佐美曲霉B1變種 3,3'-二羥基二苯二硫胰島

 


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