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ROCK抑制劑(Thiazovivin)

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 15:06:53瀏覽次數:188次

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貨號 FS-X10853
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培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱:ROCK抑制劑(Thiazovivin)

英文名稱:Thiazovivin

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10853

產品介紹:

Thiazovivin(Tzv)是新型的ROCK抑制劑,IC50為0.5μM,能促進hESC的存活。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:1226056-71-8

純度:99.32%

分子量:311.36

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

釀酒酵母小鼠干擾誘導蛋白Anti-POTEA Antibody人C反應蛋白(CRP)

淺玫瑰鏈霉菌大鼠分泌型免疫球蛋白AAnti-POTEB Antibody人C反應蛋白(CRP)

干草鞘單胞菌人胃癌標志物Anti-POTEG Antibody人固(ALD)

金黑小單孢菌小鼠上皮中性粒活化肽78Anti-POU2F1 Antibody人固(ALD)

大鼠血紅氧合2Anti-POTEH Antibody人肌紅蛋白(MYO/MB)

曲霉小鼠氧化低密度脂蛋白抗體Anti-PPARD Antibody人肌紅蛋白(MYO/MB)

*紅城紅球菌人鱗狀上皮癌抗原2Anti-PPARA Antibody人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)

產二鏈霉菌大鼠骨膠原交聯Anti-PPFIBP1 Antibody人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)

鏈格孢 蘋果專化型小鼠抗平滑肌抗體Anti-PPHLN1 Antibody人血管生成受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪激1(Tie1)

玉大斑病菌大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽Anti-PPHLN1 Antibody人血管生成受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪激1(Tie1)

尖孢鐮孢人胰腺癌標志物CA242Anti-PPIF Antibody人血管生成2(ANG-2)

人胃腸癌標志物CA199Anti-PPM1K Antibody人血管生成2(ANG-2)

黑曲霉小鼠胚胎干系MESPU30Anti-PPM1L Antibody人血管生成1(ANG-1)

白僵菌大鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉Anti-PPM1L Antibody人血管生成1(ANG-1)

擬柱形德克斯酵母大鼠吡啶交聯物Anti-PPM1K Antibody人血管生長(ANG)

死海鹽盒菌小鼠核因子κB亞基p65親和肽Anti-PPP1R11 Antibody人血管生長(ANG)

轉錄因子DP3抗體相關抗原661色二孢人結腸癌氟耐藥株

早期未分化視網膜及晶狀體蛋白EURL抗體長根小奧德蘑鱗柄變種人結腸癌耐氟細胞株

睪丸特異激底物蛋白抗體粗柄側耳(俗名:北風菌)鼠多巴胺能神經元細胞

MED17抗體青霉卵巢透明細胞癌
ROCK抑制劑(Thiazovivin)海水球 艾格瓊脂瘟病IgA抗體

孢籃狀 TM培養基瘟病IgG抗體

白黃阮繼生氏 DL-泛瘟病IgM抗體

彎孢 2-環己酮甲乙酯瘟抗體

異常威克漢姆酵母 假單胞分離肉湯間粘附分子1

糙卷霉 肌測定培養基纖連蛋白

類食品乳桿 性肉湯性結合球蛋白

魯毛霉 煙測定培養基雄烯二酮

淺黃曲霉 維生B12測定用培養基雄烯酮

香菇 測定培養基血管緊張1-7

豇豆慢生根瘤 泛測定培養基血管緊張??

薛瓦酵母 游離生物測定培養基血管內皮生長因子

大腸埃希 2-血管內皮粘附分子1

卵孢木霉 二環己基化膦血管生成1

紅緣層孔 氣單胞培養基基礎血管生成2
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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