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貨號 | FS-X10582 |
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產品介紹:
Pomalidomide作用于LPS刺激的人PBMC細胞,抑制TNF-α釋放,IC50為13nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:19171-19-8 別名:CC-4047 純度:98.0% 分子量:273.24 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
英文名稱:Pomalidomide
產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號:FS-X10582
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
植物乳桿菌鱗狀癌相關蛋白抗體Anti-PEDF(SERPINF1) Antibody固合成急性調節蛋白(STAR)
枯草芽孢桿菌S100鈣結合蛋白A6抗體Anti-PER1 Antibody固5α還原2(SRD5α2)
呈紫色菌核鏈霉菌S100鈣結合蛋白A11抗體Anti-PEG3 Antibody酪蛋白激1δ(CSNK1δ)
南類芽孢桿菌S100鈣結合蛋白P抗體Anti-PER2 Antibody酪蛋白κ(CSN3)
副凝聚短狀桿菌突觸樣蛋白5亞型2抗體Anti-PER3 Antibody酪蛋白β(CSN2)
稀褶黑菇絲合并蛋白3抗體(腫瘤差異表達蛋白)Anti-PF4 Antibody酪蛋白α(CSN1)
PL16(平菇)Smad核轉錄共抑制因子抗體Anti-PF4 Antibody酪(TYR)
嗜中溫溫暖桿菌SET易位蛋白/髓系白血病相關蛋白抗體Anti-PF4 Antibody酪轉(TAT)
膠孢SET易位蛋白/髓系白血病相關蛋白抗體Anti-PF4 Antibody酪激2(Tyk2)
玉 轉基因玉 MON89034 品系絲/蘇/酪激STYK1抗體Anti-PFN2 Antibody酪磺基轉移2(TPST2)
釀酒酵母鈉通道蛋白11α抗體Anti-PFN1 Antibody酪磺基轉移1(TPST1)
玫煙色棒束孢鈉離子通道β1抗體Anti-PGF Antibody酪3/色5單加氧激活蛋白ζ(YWHAζ)
木耳(雪白林)導向蛋白3B抗體Anti-PGF Antibody狼瘡腦抗原(LBA1)
膠凍樣芽胞桿菌鈉通道蛋白8α抗體Anti-PGK1 Antibody蘭尼定受體3(RYR3)
解脂亞羅酵母絲/蘇蛋白激SRPK1抗體Anti-PGR Antibody蘭尼定受體1(RYR1)
具黃曲霉絲蛋白抑制劑B12抗體Anti-PGK1 Antibody賴酰氧化樣蛋白4(LOXL4)
利鈉肽受體C抗體化膿鏈球菌人乳腺癌組織源細胞提取物
A型流感-NS1抗體神經1摩氏變形菌人甲狀腺癌組織源細胞提取物
高度相似的細胞周期蛋白激NEK6抗體索氏梭菌人膀胱癌組織源細胞提取物
膜內在蛋白NOD26抗體平滑正青霉(斜面)人腎癌組織源細胞提取物
TNF-α釋放抑制劑(Pomalidomide)大腸埃希 硫卷曲霉谷脫羧
癭青霉 Fmoc-N-甲基-L-異亮休克蛋白70
膜醭假絲酵母 四金 水合物谷脫羧
香菇 Fmoc-3-(2-萘基)-D-精激
芽孢桿 四金鈉 二水合物總蛋白
白色類諾卡氏 2-基苯環磷腺
冷桿 (R,R)-DACH-苯基 Trost 配體葡萄糖-6-磷脫氫
棘抱曲霉 六銠(III)鄰苯二甲二丁酯
氨桿 4-頻哪酯磷脂酰
鹽索氏 硫鋱(III) 八水合物己糖
植物乳桿 N-乙-3-甲線粒體呼吸鏈復合物I
產氣莢膜梭 C型 Irbesartansirt1去乙酰化
類布氏乳桿 DL-高瓜煙酰腺二核
球孢白僵 四溴鈀狀腺原
土壤球 溴化鈥(III)甲狀腺
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