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GSK-3抑制劑(LY2090314)

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-20 16:46:42瀏覽次數:223次

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貨號 FS-X10695
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PARC/CCL18(Human pulmonary activa

中文名稱:GSK-3抑制劑(LY2090314)

英文名稱:LY2090314

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10695

產品介紹:

LY2090314是一種有效的GSK-3抑制劑,能夠作用于GSK-3α和GSK-3β,IC50值分別為1.5nM和0.9nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:603288-22-8

純度:99.75%

分子量:512.53

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

福氏志賀氏菌神經生長因子受體的一種(抗原)Anti-CCDC88A AntibodySciellin蛋白(SCEL)

運動節桿菌重組生長分化因子8/肌肉抑制Anti-CCDC106 AntibodySATB同源框蛋白1(SATB1)

總狀毛霉原變型神經生長因子受體的一種(抗原)Anti-CCL14 AntibodySarcosynapsin蛋白(SRYP)

粗毛栓菌神經生長因子受體的一種(抗原)Anti-CCDC88A AntibodySalusinβ蛋白(Salusinβ)

曲霉促甲狀腺受體(抗原)Anti-CCL20 AntibodySalusinα蛋白(Salusinα)

芽孢桿菌半胱蛋白8抗原Anti-CCL15 AntibodySaitohin蛋白(STH)

芽孢桿菌屬促甲狀腺受體(抗原)Anti-CCL2(MCP-1) AntibodySacsin蛋白(SACS)

枯草芽孢桿菌酪羥化(抗原)Anti-CCL20 AntibodyS100鈣結合蛋白B(S100B)

金色鏈霉菌微管蛋白(抗原)Anti-CCL27 AntibodyS100鈣結合蛋白A9(S100A9)

大腸埃希氏桿菌質膜微囊蛋白-1抗原Anti-CCL3 AntibodyS100鈣結合蛋白A8(S100A8)

釀酒酵母 β-連環蛋白抗原(β-β鏈接)Anti-CCL4L1 AntibodyS100鈣結合蛋白A7(S100A7)

硬結節桿菌磷化β-連環蛋白抗原Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結合蛋白A6(S100A6)

固氮菌微管蛋白(抗原)Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結合蛋白A5(S100A5)

黃曲霉核凋亡誘導因子蛋白1(多肽)Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結合蛋白A2(S100A2)

淺黃褐蠟傘組織蛋白B抗原Anti-CCNA2 AntibodyS100鈣結合蛋白A14(S100A14)

枯草芽孢桿菌組織蛋白L抗原Anti-CCNB1 AntibodyS100鈣結合蛋白A13(S100A13)

細胞膜鈣ATP4抗體越南伯克霍爾德氏菌小鼠單核巨噬細胞白血病細胞

細胞膜鈣ATP4B抗體西伯利亞庫特氏菌人B淋巴細胞瘤細胞

細胞膜鈣轉運ATP抗體Viridibacillusarenosi小鼠主動脈血管平滑肌細胞

溶質載體蛋白家族21成員2抗體Rummeliibacillusstabekisii人高轉移肝癌細胞
GSK-3抑制劑(LY2090314)Pantoea eucalypti 2-(2-乙氧基)乙脂肪甘油三酯水解

傘枝梨頭霉 2--5-脂聯

淡青鏈霉 4-丁過氧化物體增殖因子活化受體γ

詹氏桿 己二二甲酯巴貝斯抗體

黑木耳 己二二甲酯雙芽巴貝斯抗體

大腸埃希 N.N-二甲基對苯二草鹽鈣激活中性蛋白1

貝葉多孔 3-鹽鹽新孢子蟲病

馬賽 2-乙基胰島樣生長因子

蠟狀芽孢桿 3--1-羥基自由基

解淀粉芽孢桿 3-溴-1-25羥基維生D

pET-22(b)  4-溴苯肼單鹽鹽α半乳糖基抗原

玫煙色棒束孢 基三苯基溴化膦α半乳糖抗原

總狀共頭霉 1-苯基-1-丁炔中性粒趨化因子1

茶藨子葡萄座腔 2,2,2-三氟乙基三氟磺酯鈣;鈣調蛋白依賴性蛋白激激2

短小芽孢桿 對甲苯異酯CD3分子

 


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