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TGFβR抑制劑(SB-505124)

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-20 16:44:55瀏覽次數:176次

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貨號 FS-X10692
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培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱:TGFβR抑制劑(SB-505124)

英文名稱:SB-505124

產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg

貨號:FS-X10692

產品介紹:

SB-505124是一種選擇性的TGFβR抑制劑,對ALK4,ALK5的IC50值分別為129nM和47nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:694433-59-5

純度:99.73%

分子量:335.4

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

志賀氏菌癌易感基因2抗原Anti-CALB2 AntibodySynerginγ蛋白(SYNRγ)

阿拉爾放線菌多孢菌蛋白酪磷-1B(抗原)Anti-CALHM1 AntibodySynembrynB蛋白(SYNB)

大腸埃希氏菌維甲受體-α 多肽Anti-CALB1 AntibodySynembryn蛋白(SYN)

華美鏈霉菌風疹病糖蛋白多肽片段Anti-CALR AntibodySyncollin蛋白(SYCN)

巨型艾美耳球蟲突觸相關蛋白-1(多肽抗原)Anti-CaMK1-alpha AntibodySurfeit6蛋白(SURF6)

微小小單胞菌Anti-CAMK2A AntibodySurfeit4蛋白(SURF4)

淡紫褐鏈霉菌Anti-CAMK2G AntibodySurfeit3蛋白(SURF3)

耐輻射奇球菌膽汁鹽輸出泵蛋白抗原Anti-CAMK2D AntibodySurfeit2蛋白(SURF2)

孤獨浜本酵母分泌(抗原)Anti-CAMKV AntibodySurfeit1蛋白(SURF1)

球形賴芽孢桿菌分泌受體(抗原)Anti-CAMK4 AntibodySugen激071(SGK071)

約氏不動桿菌激信號-1抑制劑(抗原)Anti-CAND2 AntibodyStrumpellin蛋白(STRUM)

果生鏈核盤菌心肌肌凝蛋白多肽Anti-CAMKV AntibodySRC/FGR/YES相關FYN癌基因(FYN)

核突觸蛋白(抗原)Anti-CAND1 AntibodySpatial蛋白(C10ORF27)

玉細菌性枯萎病菌核突觸蛋白(抗原)Anti-CANX AntibodySPARC樣蛋白1(SPARCL1)

葉點霉屬癌相關抗原抗原Anti-CANX AntibodySpacemaker蛋白(SPAM)

乳桿菌屬P物質受體(抗原)Anti-CAPN10 AntibodySp100核抗原(Sp100)

原鈣粘蛋白γA5抗體Litorimicrobiumtaeanense人滑膜成纖維細胞

血小板白細胞C激底物同源結構域M3抗體Loktanellapyoseonensis人膠質母細胞瘤細胞

p400蛋白抗體Maritaleamyrionectae人皮膚黑色瘤細胞

脈周蛋白1抗體胃癌抗原蛋白Ga50Spongiibactermarinus小鼠胰腺癌細胞(B類)
TGFβR抑制劑(SB-505124)畢赤酵母 對苯色氧化

硬柄小皮傘 4-甲氧基苯乙烯甲硫腦啡肽

*蜜環 對甲苯肼鹽鹽5羥色

孟氏假單胞 1-溴-3-苯基烷曼氏桿抗體

蠟樣芽孢桿 賓雪德拉氏綠隱色堿巴氏桿A型抗體

禾谷鐮孢 二苯基環己基膦葡萄糖

金耳 Z-L-苯氨病性腹瀉病抗體

變異短波單胞 3-肼鹽鹽巴貝斯蟲病抗體

橄欖色盤多毛孢 環己烯甲雙芽巴貝斯蟲病抗體

糞鏈球 間苯二甲-5-磺鈉(5-SSIPA)Ⅲ型膠原蛋白

羊肚 5-Ⅱ型膠原蛋白

黑曲霉 2--4'-苯基苯乙酮蛋白

中國臺灣根霉 苯基丁二饑餓

長雙歧桿長亞種 1,2,3,4-四氫喹啉環加氧1

細孢毛霉 鄰甲苯基肼鹽鹽環加氧2
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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