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PLK4抑制劑(Centrinone-B)

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 15:02:39瀏覽次數:178次

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貨號 FS-X10843
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RC

產品介紹:

Centrinone-B是一種高親和的選擇性PLK4抑制劑(Ki=0.59nM)。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:1798871-31-4

純度:98.58%

分子量:631.67

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:PLK4抑制劑(Centrinone-B)

英文名稱:Centrinone-B

產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

貨號:FS-X10843

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

谷棒桿菌人轉移因子Anti-Phospho PRAG1 (Tyr413) Antibody人基質金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)

熱灰鏈霉菌大鼠肌鈣蛋白ⅠAnti-Phospho PRKD1 (Ser738+Ser742) Antibody人基質金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)

果生鏈核盤菌小鼠銅藍蛋白Anti-Phospho PPP1R1B (Thr34) Antibody人基質金屬蛋白7(MMP-7)

釀酒酵母大鼠血清淀粉樣蛋白AAnti-Phospho PRKN (Ser1) Antibody人基質金屬蛋白7(MMP-7)

五原假黃單胞菌人結腸癌抗原Anti-Phospho PTK6 (Tyr447) Antibody人基質金屬蛋白3(MMP-3)

運動替斯崔納菌小鼠p53Anti-Phospho PRKCQ (Ser676) Antibody人基質金屬蛋白3(MMP-3)

黃藍狀菌小鼠環磷鳥Anti-Phospho PRKN (Ser378) Antibody人基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)

多食鞘桿菌大鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白Anti-Phospho PRKD2 (Ser876) Antibody人基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)

釀酒酵母人H-rasAnti-Phospho PTPN3 (PTPH1)(Ser459) Antibody人基質金屬蛋白13(MMP-13)

鞘單胞菌屬大鼠α1性糖蛋白Anti-Phospho RAD17 (Ser646) Antibody人基質金屬蛋白13(MMP-13)

白長鏈霉菌人c-sisAnti-Phospho RAF1 (Ser301) Antibody人基質金屬蛋白(MMP-)

光柄滑銹傘小鼠一氧化氮合成Anti-Phospho RAF1 (Ser642) Antibody人基質金屬蛋白(MMP-)

植物乳桿菌小鼠誘導型一氧化氮合成Anti-Phospho RAPGEF1 (Tyr504) Antibody人基質金屬蛋白1(MMP-1)

Paraburkholderia sp.大鼠內皮型一氧化氮合成3Anti-Phospho RB1 (Ser780) Antibody人基質金屬蛋白1(MMP-1)

葡萄座腔菌人c-junAnti-Phospho RHO (Ser334) Antibody人FMS樣酪激3(Flt3)

凝結芽胞桿菌人c-fosAnti-Phospho RPA2 (S33) Antibody人FMS樣酪激3(Flt3)

20號染色體開放閱讀框11抗體殼蕉孢屬人腎癌Wilms細胞

跨膜蛋白TMED4抗體粉紫香蘑人永生化表皮細胞

末端脫氧核轉移抗體綠菇人套細胞淋巴瘤細胞

肺癌抑癌蛋白1抗體橘紅多孔菌人皮膚基底細胞癌細胞
PLK4抑制劑(Centrinone-B)庫氏野野村氏 甲基烯酰氧基三(基硅氧烷基)硅烷白介17A

白迷孔 3%MR-VP培養基白介17F

光滑青霉 氧化試劑白介18

孟氏假單胞 3%NaClONPG白介1β

蘇云金芽孢桿加拿大亞種 2,5-二白介2

鴨疫里氏桿 改良山梨麥康凱(CT-SMAC)瓊脂白介21

冷海水黃桿 改良山梨麥康凱瓊脂添加劑白介22

金龜子綠僵 改良EC肉湯(mEC+n)白介23

球形賴芽孢桿 辛基溴化鎂溶液白介4

海洋海源 新生霉白介6

魯氏酵母 三溴砜白介8

克羅諾桿屬 2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]乙半胱蛋白抑制劑;胱抑C

斯氏假單胞 氧化試紙胞漿型磷脂A2

普利茅斯沙雷氏 實驗生化管表皮生長因子

污黃小菇 沙門氏A-F群診斷血清二

 


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