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smoothened抑制劑(PF-04449913)

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 14:58:38瀏覽次數:198次

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貨號 FS-X10832
smoothened抑制劑(PF-04449913)正在熱銷的產品:ASO(Human streptolysin O) ELISA Kit 人抗鏈球菌溶血O/抗O二鋅 1.0 M in Hexane
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GBM(Human glomerular basement memb

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱:smoothened抑制劑(PF-04449913)

英文名稱:PF-04449913

產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10832

產品介紹:

PF-04449913是一種有效的smoothened抑制劑。PF-04449913結合到人SMO(181-787氨基酸位點),IC50為4nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:1095173-27-5

別名:Glasdegib

純度:99.31%

分子量:374.44

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

寡鞘單胞菌小鼠羥脯Anti-PBOV1 Antibody人花生四烯5脂加氧(ALOX-5)

Arthrobacter人神經降壓Anti-PCDH11Y Antibody人花生四烯5脂加氧(ALOX-5)

普利茅斯大鼠解整合樣金屬蛋白8Anti-PDEA Antibody人5脂加氧(5-LO/LOX)

痢疾志賀氏菌大鼠抗Anti-PDE4C Antibody人5脂加氧(5-LO/LOX)

赭鱗蘑菇人神經激肽BAnti-PDGFC Antibody人腺環化1(AC-1)

俄勒岡靈芝小鼠骨保護配體Anti-PDE4C Antibody人腺環化1(AC-1)

苜蓿中華根瘤菌大鼠胰島抗體Anti-PDGFD Antibody人可溶性腺環化(sAC)

扣囊復膜孢酵母小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白Anti-PDGFRA Antibody人可溶性腺環化(sAC)

小馬勃人強啡肽Anti-PDHA1 Antibody人鳥脫羧(ODC)

灰黃淺黃酵母小鼠抗肌內膜抗體IgAAnti-PDIA4 Antibody人鳥脫羧(ODC)

貝氏葡萄座腔菌大鼠腎損傷分子1Anti-PDHA1 Antibody人蛋白酪激(PTK/CD115)

擬鷲峰假絲酵母人腦啡肽Anti-PDIK1L Antibody人蛋白酪激(PTK/CD115)

枯草芽孢桿菌大鼠抗單核抗體Anti-PDLIM1 Antibody人蛋白酪磷(PTP/PTPase/CD148)

紅色蠟蘑人γ肽Anti-PDP2 Antibody人蛋白酪磷(PTP/PTPase/CD148)

小鼠鐵蛋白Anti-PDK1 Antibody人腫瘤壞死因子α轉化(TACE)

食砜節桿菌小鼠碳酐2Anti-PDPK1 Antibody人腫瘤壞死因子α轉化(TACE)

RPS27A抗體栗疫菌大鼠膀胱成纖維細胞*培養基:

RHOG抗體矩圓黑盤孢大鼠海綿體內皮細胞*培養基:

髓系細胞觸發受體1抗體樟疫霉人胃癌阿霉耐藥株

/睪丸抗原113抗體*被孢霉屬人腎囊腫襯里上皮細胞
smoothened抑制劑(PF-04449913)植物乳桿 3-苯乙酯抗鴨甲肝病A型3抗體

大腸埃希 癸球蛋白M

秦氏蜜環 十四內

白靈側耳 2-溴-4'-基苯乙酮D-乳脫氫

大腸埃希 6--1-己脂多糖

聚生殼 1-(2-乙基)鹽鹽雌受體

曲霉 重鉻吡啶鎓圓環病抗體

耐輻射薄層 乙鹽鹽圓環病

鏈霉屬 2,4-二巰基嘧啶ATP合成

瑞士乳桿 DL-氨酰-DL-亮三磷腺

暗棕色桿屬 1-(硅烷氧基)環戊烯Ca2+ATP

長柄大環柄菇 2-(甲硫基)-2-噻唑啉巴氏桿抗體

鞘氨單胞 2--4-氟黑色

細疣籃狀 2-氟-L-苯促卵泡

尖孢鐮孢 苝孕酮
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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