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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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羅丹明123染色試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-09 11:21:19瀏覽次數(shù):168次

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貨號(hào) FS-X9583
羅丹明123染色試劑盒正在熱銷的產(chǎn)品:β-淀粉mei測(cè)試盒 規(guī)格:50管/24樣 測(cè)試方法:可見分光光度法
ADPG焦磷suan化mei(AGP)測(cè)試盒 規(guī)格:100管/96樣 測(cè)試方法:微量法
ADPG焦磷suan化mei(AGP)測(cè)試盒 規(guī)格:50管/48樣 測(cè)試方法:紫外分光光度法
ADPG焦磷suan化mei(AGP)測(cè)試盒 規(guī)格:25管/24樣 測(cè)試方法:紫外分光光度法
可溶性淀

中文名稱:羅丹明123染色試劑盒

英文名稱:Cell Apoptosis Detection Kit(Rhodamine 123)

產(chǎn)品規(guī)格:100T

貨號(hào):FS-X9583

產(chǎn)品介紹:

本試劑盒適用于培養(yǎng)的細(xì)胞或從組織中提取出的線粒體的膜電位檢測(cè)。羅丹明123(Rhodamine 123)是一種可透過細(xì)胞膜的陽離子熒光染料,是一種線粒體跨膜電位的指示劑。它可以快速通過細(xì)胞膜,僅需幾分鐘就可以被具有活性的線粒體所俘獲,并且對(duì)細(xì)胞沒有任何毒性。其大激發(fā)波長為507nm,大發(fā)射波長為529nm。在熒光顯微鏡下觀察,呈現(xiàn)黃綠色熒光,也可用熒光光度計(jì)或流式細(xì)胞儀檢測(cè),通過熒光信號(hào)的強(qiáng)弱來檢測(cè)線粒體膜電位的變化和凋亡的發(fā)生。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

組織蛋白meiG自身抗體(Cath G Ab)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:Cath G Ab ELISA Kit,Cath G Ab,

周期su依賴性激mei7(CDK-7)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:CDK-7 ELISA Kit,CDK-7,

中性粒細(xì)胞性磷suanmei(NAP)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:NAP ELISA Kit,NAP,

著絲粒蛋白B(CENP-B)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:CENP-B ELISA Kit,CENP-B,

游離脂肪suan(FFA)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:FFA ELISA Kit,F(xiàn)FA,

異鎖鏈su(IDES)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:IDES ELISA Kit,IDES,

胰島su受體底物1(IRS1)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:IRS1 ELISA Kit,IRS1,

UDP半乳糖-4-差向異構(gòu)mei(GALE)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:GALE ELISA Kit,GALE,

Sideroflexin2蛋白(SFXN2)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:SFXN2 ELISA Kit,SFXN2,

TATA盒結(jié)合蛋白(TBP)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:TBP ELISA Kit,TBP,

RNA結(jié)合基元蛋白20(RBM20)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:RBM20 ELISA Kit,RBM20,

Podocin蛋白(PDCN)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:PDCN ELISA Kit,PDCN,

N-乙酰β-D-氨基葡萄糖mei(NAGase)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:NAGase ELISA Kit,NAGase,

Neuroguidin蛋白(NGDN)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:NGDN ELISA Kit,NGDN,

Megane蛋白(Mgn)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:Mgn ELISA Kit,Mgn,

Janus激mei2(JAK2)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:JAK2 ELISA Kit,JAK2,

GTP環(huán)化水解mei1(GCH1)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:GCH1 ELISA Kit,GCH1,
羅丹明123染色試劑盒suan地美環(huán)su標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:

suan金霉su標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:

芝麻油相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:6mg×3vials  英文名稱:

呋辛酯標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:350mg  英文名稱:Cefuroxime Axetil

suan心得平標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Oxprenolol Hydrochloride

異麥芽tong糖chun標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Isomalt

jia密an標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:500mg  英文名稱:Altretamine

托美丁鈉標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:500mg  英文名稱:Tolmetin Sodium

噻肟鈉標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:350mg  英文名稱:Cefotaxime Sodium

suan替扎尼定標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Tizanidine Hydrochloride

 


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