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葡萄糖代謝抑制劑

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 11:06:00瀏覽次數:176次

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貨號 FS-X10300
葡萄糖代謝抑制劑正在熱銷的產品:Nur77/GFRP/FITC 熒光標記孤兒核受體蛋白Nur77抗體IgG氨水 for LC-MS,≥25% in H2O
Phospho-Nur77 (Ser351) /FITC 熒光標記化孤兒核受體蛋白Nur77抗體IgG氨水 28% in H2O, ≥99.999% metals basis
OAS1/FITC 熒光標記寡腺合成-1抗體IgG丁酯 sta

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱:葡萄糖代謝抑制劑

英文名稱:2-Deoxy-D-glucose

產品規格:1mL(10mM)|1g|5g

貨號:FS-X10300

產品介紹:

英文名稱:2-Deoxy-D-glucose

產品規格:1mL(10mM)|1g|5g

2-Deoxy-D-glucose是一種葡萄糖類似物,為葡萄糖代謝抑制劑,通過作用于己糖激酶(hexokinase)來抑制糖酵解。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:154-17-6

別名:2-Deoxy-D-arabino-hexose;D-Arabino-2-deoxyhexose

純度:98.84%

分子量:164.16

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鴨疫里氏桿菌Kelch樣蛋白24抗體Human POLD3 新生甲狀腺(NN-T4)

異常漢遜酵母異常變種Kelch樣蛋白21抗體Human PNKD(Paroxysmal nonkinesiogenic dyskinesia protein) 新生兒促甲狀腺(N-TSH)

擲孢酵母Kelch樣蛋白25抗體Human LRP6(Low-density lipoprotein receptor-related protein 6) 新喋呤(NEOP)

卷柄根霉驅動蛋白KNS1抗體Human PNLDC1 鋅轉運蛋白6(ZnT6)

枯草芽孢桿菌驅動蛋白家族成員1B抗體Human PNMA1 鋅轉運蛋白4(ZnT4)

腫痂鏈霉菌劍蛋白p80抗體Human PNKP 鋅指蛋白RIZ(PRDM2)

奧氏蜜環菌樣蛋白1抗體Human PNMA2 鋅指蛋白644(ZNF644)

克雷伯氏菌組蛋白H3K9甲基轉移4抗體Human PMF1 鋅α2糖蛋白(AZGP1)

黑曲霉離子通道蛋白家族成員3抗體Human PMFBP1 心型脂肪結合蛋白(h-FABP)

空腸彎曲桿菌角蛋白82抗體Human KRT6A(KeRatin, type II cytoskeletal 6A) 心鈉肽(ANP)

草鏈霉菌20號染色體開放閱讀框19抗體Human PNMA2 心納(ANF)

粉褐粉孢牛肝菌*角膜蛋白多糖抗體Human PMFBP1 心肌營養1(CT-1)

空泡單胞菌含賴卷曲螺旋蛋白1抗體Human KRT6A(KeRatin, type II cytoskeletal 6A) 心肌膜B1-AR(B1-AR)

釀酒酵母激肽釋放3/舒血管3抗體Human PMF1 心肌特異性肌鈣蛋白T(c)

中慢生華癸根瘤菌上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體Human PLS1 心肌錨蛋白重復域1(ANKRD1)

植物乳桿菌腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體Human PLP2(Proteolipid protein 2) 心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)

沙福芽孢桿菌Bacillus│safensis 質量規格:>99.0%(GC)(T)5-O-基維斯阿

美味牛肝菌Boletus│edulis Bull.:Fr. 質量規格:>98.0%(HPLC)(T)松果菊

白色假絲酵母Candidaalbicans(Robin)Berkhout 質量規格:>98.0%(HPLC)(T)異類葉升麻
葡萄糖代謝抑制劑Pseudomonas  oryzihabitans 2-氨基-1-(2,5-二甲氧基苯基)乙酮鹽鹽α2 腎上腺能受體

菜豆間座殼 4-苯基咪唑幽門螺桿尿

克魯斯假絲酵母 (RS)-2-氨基-1,1,1-三氟烷 鹽鹽SRC;FGR;YES相關FYN癌基因

灰色鏈霉銹色變種 1-溴-2,4,5-三苯脂酰CoA合成

地衣芽孢桿 1,4-二-2-苯DPPH自由基清除能力

威特弗拉里亞鞘氨盒 5-溴吡啶-2-羧甲酯早期應答基因3

馬德里毛殼 4'-芐氧基-2'-羥基苯乙酮果膠

花生根瘤 5-甲基煙甲酯纖維

肉質鏈霉 噻-2-甲肟抗硬皮病70

戈登氏(加詞待譯) 2-氟-5-甲甲酯非受體型蛋白酪磷2

食石油類諾卡氏 (R)-2-羥基-4-苯基丁ATP結合盒轉運體G2

桃中田殼小圓孢 2--5-氟苯乙酮干燥綜合征抗原A1

釀酒酵母 甲脒鹽鹽肉堿軟脂酰基轉移1

布氏假單胞 1,4-苯并二惡烷-6-甲抗sp100抗體

毛柄(金針菇) 2-氟-4-苯白介14
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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