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貨號 | FS-X10598 |
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產品介紹:
A939572是一種有效的SCD1抑制劑,作用于mSCD1和hSCD1,IC50分別為<4nM和37nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1032229-33-6 別名:stearoyl-CoA desaturase (SCD) inhibitor;SCD-inhibitor 純度:99.79% 分子量:387.86 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:SCD1抑制劑(A939572)
英文名稱:A939572
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
貨號:FS-X10598
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
蒙氏假單胞菌磷化信號轉導分子SMAD3抗體Anti-PTGER2 Antibody甲狀腺受體α(THRα)
乳鏈球菌4羥基壬烯抗體Anti-PTGER4 Antibody甲狀腺激自身抗體(THAA)
德氏乳桿菌神經突出相關蛋白Slitrk1抗體Anti-PTGES3 Antibody甲狀腺激反應基因(THRSP)
峽灣嗜冷桿菌菌體蛋白抗體Anti-PTGS1 Antibody甲狀旁腺受體2(PTHR2)
茄鐮孢骨形態發生抑制蛋白SOST抗體Anti-PTGS1 Antibody甲狀旁腺受體1(PTHR1)
酒紅鏈霉菌24脫氫膽固還原抗體Anti-PTGS2 Antibody甲狀旁腺激2(PTH2)
云芝栓孔菌(變色栓菌)膽鹽磺基轉移Anti-PTGS1 Antibody(PB0036)甲型肝炎病受體2(HAVCR2)
靈芝屬轉錄因子SOX9蛋白抗體Anti-PTH1R Antibody甲酰肽受體2(FPR2)
銅綠假單胞菌磷化轉錄因子SOX9蛋白抗體Anti-PTGS2 Antibody甲巰蛋白(TPN)
泰國葡糖桿菌磷化蛋白酪磷2抗體Anti-PTGS2 Antibody甲羥戊脫羧(MVD)
中慢生華癸根瘤菌長鏈脂肪連接抗體Anti-PTGS2 Antibody甲羥戊激(MVK)
油白蘑超氧化物歧化3抗體Anti-PTK2 Antibody甲硫腺磷化(MTAP)
黃色單胞菌硫酯2蛋白抗體Anti-PTN Antibody甲硫酰肽2(METAP2)
寡氧單胞菌Rho GTP激活蛋白13抗體Anti-PTK2 Antibody甲硫酰肽1(METAP1)
蘇云金芽孢桿菌鉻瘤患者抑癌基因SDHB抗體Anti-PTN Antibody巴1β(MEP1β)
針葉散斑殼菌類固5α還原2抗體Anti-PTP4A2 Antibody巴1α(MEP1α)
腺二核1抗體庫氏棒桿菌小鼠胰島細胞提取物
鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體Staphylococcuscarnosussubsp.carnosus小鼠甲狀腺上皮細胞提取物
核孔復合體蛋白抗體小片球菌小鼠胰腺上皮細胞提取物
霉敏感性肽蛋白抗體麻疹孿生球菌小鼠乳腺上皮細胞提取物
SCD1抑制劑(A939572)*美味牛肝 5-硝基間苯二甲二甲酯硫轉移
白色噬瓊膠 (3S)-(-)-3-(二甲氨基)吡咯烷類胰蛋白
大豆慢生根瘤 鹽樂卡地平旋毛蟲IgG抗體
乳粉孢 化鎢查爾酮異構
鞘氨盒屬 4--2,5-二氟三磷腺
空腸彎曲桿 碲化銻(III)磷脂
牛艾美耳球蟲 三吡咯烷基溴化鏻六氟磷鹽磷脂肌3激
大腸埃希 D-葡萄烯糖苯解氨
發皮安假絲酵母 4-(2-氨乙基)吡啶磷化腺活化蛋白激
香菇 Nα-Boc-Nδ-三苯甲基-L-谷氨酰甘油激
*美味牛肝 Nα-Fmoc-Nγ-三苯甲游基-L-谷五氟苯酯山梨脫氫
粉紅單端孢 L-天門冬二維生C
三葉草根瘤 Fmoc-N-三苯甲基-L-谷氨酰1,4,5-三磷肌
白側耳 5-基硅烷基-4-戊炔-1-色P450單加氧
漢遜德巴利酵母fabryi變種 Cilnidipine睪酮
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