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MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-09 14:13:53瀏覽次數(shù):165次

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貨號 FS-X9709
MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒正在熱銷的產(chǎn)品:phospho-Bim(Ser69) 化死亡調(diào)解子抗體烯異癸酯 98%,含70-100ppm對苯二酚穩(wěn)定劑
BIRC5/Survivin variant 凋亡抑制因子5抗體2-丁酮 97%
BK channel BK通道蛋白抗體亞油 99%
BKCa channels 鈣激活通道蛋白抗體1,2,3,4,5,6-六環(huán)己烷
Bmi1/PCGF

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

中文名稱:MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:250T|500T|1000T

貨號:FS-X9709

產(chǎn)品介紹:

MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒是應(yīng)用新型的水溶性甲臢化合物[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁),內(nèi)鹽;MTS]快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。

MTS被細胞生物還原成一種可溶于組織培養(yǎng)基的甲臢化合物,新陳代謝活躍的活細胞內(nèi)的脫氫酶類將MTS轉(zhuǎn)化成液態(tài)可溶的甲臢化合物,這種甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上測量,而不需要另外作處理。由490nm測量的吸收值所表示的甲臢產(chǎn)物的數(shù)量與培養(yǎng)物中活性細胞的數(shù)量成正比。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數(shù)量呈線性關(guān)系。

MTS溶液可以直接加入到細胞樣品中,不需要預(yù)配各種成分,MTS溶液很穩(wěn)定,對細胞沒有毒性,可以長時間孵育細胞。MTS法測定細胞增殖或毒性試驗中活細胞數(shù)目的靈敏度高,無放射性,檢測細胞增殖實驗的靈敏度比其它方法如MTT,XTT和WST-1高。

儲存條件:2-8℃避光保存。長期不用的分裝后于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。

有效期:一年。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)英文名:MMP-3 丁酰基合成3抗體包裝5g

基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)英文名:MMP-2/Gelatinase A 脂肪源性亮基肽抗體(血管內(nèi)皮生長因子誘導(dǎo)蛋白)包裝1g

基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)英文名:MMP-13 線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體包裝250mg

基質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10)英文名:MMP-10 ABL2蛋白抗體包裝1g

基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)英文名:MMP-1 血管緊張轉(zhuǎn)換ACE1抗體包裝5g

基質(zhì)γ羧基谷蛋白(MGP)英文名:MGP 血管緊張轉(zhuǎn)換2抗體包裝100ml

肌激同工MM(CK-MM)英文名:CK-MM Acinus抗體包裝25ml

肌激同工MB(CK-MB)英文名:CK-MB 醋激1抗體包裝100ml

肌激(CK)英文名:CK 促腎上腺皮質(zhì)激(1-39)抗體包裝25ml

肌生成抑制(MSTN)英文名:MSTN 促腎上腺皮質(zhì)激ACTH(18-39)抗體包裝1g

肌球蛋白重鏈(MHC)英文名:MHC 促腎上腺皮質(zhì)激ACTH (7-23)抗體包裝25g

肌球蛋白(MYS)英文名:MYS 活性依賴的神經(jīng)保護肽抗體包裝100g

肌紅蛋白(MYO/MB)英文名:MYO/MB α1性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體包裝25g

肌酐(Cr)英文名:Cr α1性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)包裝1g

肌鈣蛋白T(Tn-T)英文名:Tn-T 磷化通道蛋白2抗體包裝25g

鹽轉(zhuǎn)運三磷腺苷抗體血紅結(jié)合蛋白(HPX)Tofacitinib (CP-690550,Tasocitinib) is a novel inhibitor of JAK3 with IC50 of 1
MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒陰溝腸桿(陰溝腸桿陰溝亞種) (6-芐基-6H-吡咯[3,4-B]吡啶-5,7-二酮)富含半胱氨型酸性蛋白

糞腸球 乙蟲富亮氨α2糖蛋白1

大麗花輪枝孢(棉花黃萎病) 5-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯鈣泵

肺炎克雷伯 4-羥基吖啶鈣離子通道抗體

大腸埃希氏桿 5--3-硝基-2-基吡啶鈣調(diào);鈣調(diào)蛋白

黑腐皮殼 6-溴喹啉-2-酮鈣調(diào)依賴性蛋白激2

河北木霉 2-(2-乙酰氨基)-5-硝基-2'-二苯甲酮鈣網(wǎng)蛋白

滑假絲酵母 2-溴-4-甲基-6-氟吡啶鈣衛(wèi)蛋白

香蕉 6-氨基-5-溴甘氨酰脯酸二肽氨基肽

靈芝(紅芝, 赤芝) 2-(1H-吡唑-4-基)乙甘酸-N-甲基轉(zhuǎn)移

泰塔溫沙壤土桿 4-甘露聚糖結(jié)合凝集酸肽-2

中慢生華癸根瘤 1-(4-三氟甲基嘧啶-2-基)哌甘露聚糖結(jié)合凝集相關(guān)絲酸蛋白

肉梭 C型 6-甲氧基-7-芐氧基喹唑啉-4-酮甘露糖結(jié)合蛋白;甘露糖結(jié)合凝集

炭黑曲霉 3-叔丁氧酰基氮雜環(huán)庚烷甘露糖受體

芽胞桿 4-乙氧基-3-硝基吡啶甘油-3-磷酸脫氫
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)


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