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ERRα反向激動劑(XCT-790)

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品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 14:35:17瀏覽次數(shù):191次

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貨號 FS-X10804
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PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人

中文名稱:ERRα反向激動劑(XCT-790)

英文名稱:XCT790

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg

貨號:FS-X10804

產(chǎn)品介紹:

XCT-790是雌激素相關(guān)受體(ERR)α反向激動劑,能誘導(dǎo)化療抗性的癌細(xì)胞死亡。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:725247-18-7

純度:98.01%

分子量:596.42

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

松杉靈芝大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激Anti-NDRG4 Antibody人組織蛋白K(cath-K)

葡萄座腔菌大鼠檸檬合Anti-NDUFA4L2 Antibody人組織蛋白K(cath-K)

釀酒酵母兔子血小板因子4Anti-NDUFA9 Antibody人骨形成蛋白(BMPs)

爪哇鏈霉菌植物維生CAnti-NDUFA4L2 Antibody人骨形成蛋白(BMPs)

矩圓黑盤孢小鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6Anti-NDUFA8 Antibody人視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)

sto128(大球蓋菇)人集落激因子Anti-NDUFB1 Antibody人視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)

灰藍(lán)毛霉兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白Anti-NDUFB9 Antibody人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)

污水溶桿菌人γ干擾誘導(dǎo)單核因子Anti-NDUFS5 Antibody人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)

深紅酵母α-銀環(huán)蛇Anti-NDUFB10 Antibody人垂草扁桃(VMA)

煙曲霉小鼠巨噬炎性蛋白1δAnti-NDUFA9 Antibody人垂草扁桃(VMA)

黑曲霉大鼠L-鼠乳脫氫Anti-NDUFC2 Antibody人葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)

腸沙門氏菌腸亞種嬰兒血清型大鼠脂酰合成Anti-NDUFV3 Antibody人葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)

黑曲霉人肥胖抑制Anti-NECTIN1 Antibody人血凝(HA)

根瘤菌屬小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子Anti-NDUFV2 Antibody人血凝(HA)

克魯斯假絲酵母兔子中性粒彈性蛋白Anti-NECAB3 Antibody人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)

枯草芽胞桿菌枯草亞種蘇云金芽孢桿菌蛋白Anti-NECTIN2 Antibody人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)

鳥核交換因子抗體黑荊樹根瘤菌人膀胱癌細(xì)胞(2014年9月新引進(jìn))(干細(xì)胞庫保藏)

核糖體結(jié)合因子RBFA抗體中國臺灣相思根瘤菌人絨毛膜癌細(xì)胞

環(huán)指蛋白166抗體南洋楹根瘤菌小鼠白血病克細(xì)胞系

環(huán)指蛋白19B抗體假木豆根瘤菌人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
ERRα反向激動劑(XCT-790)地衣芽孢桿 改良MS-H培養(yǎng)基戊型肝炎病抗原

長枝木霉 WLN培養(yǎng)基前列腺E合2

土曲霉 硫代苯甲酰血紅

假單胞 梭屬測定用培養(yǎng)基阿霉

加利福尼亞犁頭霉 營養(yǎng)瓊脂內(nèi)皮受體A

甲基營養(yǎng)型芽胞桿 SB培養(yǎng)基內(nèi)皮受體B

膠孢 明膠磷鹽緩沖液Ⅲ型膠原

綠穗霉 C81V培養(yǎng)基脂蛋白脂

哈茨木霉 脆弱擬桿活化培養(yǎng)基肉湯肝脂

枯草芽孢桿 ModifiedSclohtens'Broth(MSB)鎖鏈

束狀盤孢 含1%水楊的PY培養(yǎng)基尿

Rhizobium 含1%棉籽糖的PY培養(yǎng)基半胱蛋白13

卡爾斯伯酵母 PPLO瓊脂增殖核抗原

解肝磷脂土地桿 精肉湯果糖二磷縮A

中國臺灣卓貝爾氏 葡萄糖肉湯果糖二磷縮A

 


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