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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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POD過氧化物酶檢測試劑盒微量法

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-04-11 12:03:03瀏覽次數(shù):100次

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貨號(hào) FS-01S63293
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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱:POD過氧化物酶檢測試劑盒微量法

規(guī)格:100管/96樣

檢測方法:微量法

貨號(hào):FS-01S63293
商品介紹:

測定意義

POD(EC 1.11.1.7)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。

測定原理:

POD催化H2O2氧化特定底物,在470nm有特征光吸收。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
小鼠細(xì)胞周期D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒圖片鰒發(fā)光桿Porcine PRB2 (Basic Salivary Proline Rich Protein 2) ELISA Kit

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大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)elisa試劑盒圖片釀酒酵母Porcine MUC17 (Mucin 17) ELISA Kit

大鼠細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)elisa試劑盒售后服務(wù)繩狀孢子懸浮液Porcine ERK3 (Extracellular Signal Regulated Kinase 3) ELISA Kit

大鼠磷化蛋白激C(P-PKC)elisa試劑盒進(jìn)口試劑釀酒酵母Porcien PLAU/uPA(Urokinase-Type Plasminogen Activator) ELISA Kit

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大鼠細(xì)胞色P4502E1(CYP2E1)elisa試劑盒運(yùn)輸嗜鹽涅斯特連科氏Porcine CGα (Chorionic Gonadotropin Alpha Polypeptide) ELISA Kit

大鼠纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)elisa試劑盒保存孔狀短小莖點(diǎn)霉Porcine GFAP (Glial Fibrillary Acidic Protein) ELISA Kit
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球蛋白D重鏈保守區(qū)抗體Human PSTPIP1 ELISA Kit氫檳榔

IV型己糖激抗體Human PTBP1 ELISA Kit人參皂苷 Rf

球蛋白lambda樣肽1抗體Human PTCD3 ELISA Kit莪術(shù)二酮

NF-kappa-B抑制子beta抗體Human PTCH1 ELISA Kit巴豆苷

NF-kappa-B抑制子epsilon抗體Human PTCH2 ELISA Kit廣草

/蘇蛋白激ICK抗體Human PTAFR ELISA Kit布美

纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白172抗體Human PTBP1 ELISA Kit舒林

 


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