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貨號(hào)	FS-01S63328

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

規(guī)格：100管/96樣

檢測(cè)方法：微量法

貨號(hào)：FS-01S63328
商品介紹：

測(cè)定意義

羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子，造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損，進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一，在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。

測(cè)定原理：

H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，水楊酸能有效捕捉產(chǎn)生的羥自由基并與其反應(yīng)生成有色物質(zhì)2，3-二羥基苯甲酸，在510nm處有最大吸收峰，加入具有清除能力的物質(zhì)后，有色物質(zhì)便會(huì)減少，從而可以根據(jù)吸光值的數(shù)值判斷樣品清除羥自由基的能力。

自備實(shí)驗(yàn)用品：

恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取：

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

小鼠蛋白酪磷N型受體(PTPRN)試劑盒Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) ELISA Kit8號(hào)染色體開放閱讀框72抗體

小鼠蛋白酪磷O型受體(PTPRO)試劑盒Human CD5L(CD5 antigen-like) ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框30抗體

小鼠原鈣粘蛋白1(PCDH1)試劑盒Human FAM3B(Protein FAM3B) ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框57抗體

小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)試劑盒 Human MYOF(Myoferlin) ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框36抗體

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒Human GFRA1(GDNF family receptor alpha-1) ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框42抗體

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)試劑盒Human GLIPR1(Glioma pathogenesis-related protein 1) ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框43抗體

小鼠酮脫氫α(PDHa)試劑盒Human HSD3B1(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta 5–>4-isomerase type 1) ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框44抗體

小鼠酮脫氫激4(PDK4)試劑盒Human ATG12(Ubiquitin-like protein ATG12) ELISA Kit8號(hào)染色體開放閱讀框40抗體

小鼠酮脫氫磷(PDP)試劑盒Human FOLR2(Folate receptor beta) ELISA Kit8號(hào)染色體開放閱讀框37抗體

小鼠酮脫氫E1(PDH E1) 聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) ELISA Kit8號(hào)染色體開放閱讀框45抗體

小鼠肝臟及紅酮激(PK)試劑盒Human B4GALT5(Beta-1,4-galactosyltransferase 5) ELISA Kit8號(hào)染色體開放閱讀框80抗體

小鼠酮激M2型同工(M2-PK)試劑盒Human CAMKK2(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2) ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框3抗體

小鼠酮激(PK)試劑盒 Human NOTCH2(Neurogenic locus notch homolog protein 2) ELISA Kit8號(hào)染色體開放閱讀框47抗體

小鼠Qa抗原2(Qa-2)試劑盒 Human NOTCH4(Neurogenic locus notch homolog protein 4) ELISA Kit8號(hào)染色體開放閱讀框48抗體

小鼠Rap鳥交換因子2(RAPGEF2)試劑盒Human AMOTL1(Angiomotin-like protein 1) ELISA Kit8號(hào)染色體開放閱讀框58抗體
羥自由基清除能力檢測(cè)試劑盒微量法乙二乙乙酯 AR,98%六氟鋁鈉 AR,99%HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta) 熱休克蛋白-90β （抗原）

乙二乙乙酯 99%2-氯-3-基-4-甲基吡 98%IASPP(inhibitory member of the ASPP family) 腫瘤凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員(抗原)

乙二乙 CP,95%3'- 乙酰基乙酮 98%CD54 ICAM-1 (Intercellular dhesion molecule 1; CD54 Anti-gen;) 間粘附分子-1(多肽抗原)

乙二乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)畢卡魯 98%IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介1β（白介-1β）(多肽抗原)

乙二乙 >99%(GC)1,1-環(huán)基二羧二甲酯 97%IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白（抗原）

乙二丁 GCS, ≥99.5% (GC)2,3-二氟 97%IL-6(Interleukin-6) 白介6（白介-6）(多肽抗原)

乙二丁光譜純2-氟酮 98%IL-10(Interleukin-10) 白介10（白介-10）(抗原)

乙二丁 for HPLC-GC, ≥99.5% (GC)5-氟-2-羥基乙酮 97%IL-8 白介8（白介-8）(抗原)