【儀表網(wǎng) 儀表標(biāo)準(zhǔn)】由全國生物計量技術(shù)委員會對口負(fù)責(zé)的《細(xì)胞計數(shù)儀校準(zhǔn)規(guī)范》征求意見稿已經(jīng)起草完成，現(xiàn)各位專家及委員廣泛征求意見。意見反饋郵箱：liuyy@nim.ac.cn。
 

　　細(xì)胞計數(shù)是一項基本的生物測量活動，主要應(yīng)用臨床檢驗、生物藥物開發(fā)、細(xì)胞治療、質(zhì)量檢測等生物技術(shù)領(lǐng)域中。細(xì)胞計數(shù)的傳統(tǒng)方法是采用血球計數(shù)板在顯微鏡下進(jìn)行人工計數(shù)，該方法易受操作細(xì)節(jié)和操作者的主觀判斷影響，而且檢測通量小從而導(dǎo)致方法的精確性不高，并且費時費力，不適合于大規(guī)模的細(xì)胞測量。全自動細(xì)胞計數(shù)分析儀擺脫了手工計數(shù)細(xì)胞的繁復(fù)，同時結(jié)果更加準(zhǔn)確客觀，操作快速簡便，重復(fù)性好。近年來隨著細(xì)胞治療和生物藥物產(chǎn)業(yè)的迅速崛起，用于相關(guān)細(xì)胞產(chǎn)品質(zhì)量評價分析的細(xì)胞計數(shù)儀被廣泛采用。目前，市面上自動細(xì)胞計數(shù)儀的品牌繁多，主要的技術(shù)原理主要有兩種：基于細(xì)胞顯微圖像的和基于庫爾特原理的。
 

　　隨著多數(shù)細(xì)胞計數(shù)儀的廣泛應(yīng)用，其測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)化已成為關(guān)注點。理想情況下，同一樣本在不同實驗室、不同時間段、使用不同細(xì)胞計數(shù)儀，同一參數(shù)的測定結(jié)果應(yīng)該一致，只可能受生物學(xué)變異的影響。但是，面對眾多的細(xì)胞計數(shù)檢測硬件平臺和試劑體系，目前還沒有一個建立完善的計量基標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)對其量值溯源提供技術(shù)保證，從而保證不同體系之間測量的可比性和準(zhǔn)確性。
 

　　因此，急需制定細(xì)胞計數(shù)儀的計量校準(zhǔn)規(guī)范，使得臨床和醫(yī)藥行業(yè)的細(xì)胞測量儀使用標(biāo)準(zhǔn)得以統(tǒng)一，使此類標(biāo)準(zhǔn)器具的校準(zhǔn)工作做到更加標(biāo)準(zhǔn)化和系統(tǒng)化。
 

　　《細(xì)胞計數(shù)儀校準(zhǔn)規(guī)范》依據(jù)JJF 1071-2010 《國家計量校準(zhǔn)規(guī)范編寫規(guī)則》、JJF 1059.1-2012 《測量不確定度評定與表示》等完成規(guī)范的制定。在本規(guī)范制定過程中，也參考了現(xiàn)行有效的 ISO/DIS 20391-1:2018Biotechnology - Cell counting - Part 1: General guidance on cell counting methods和JJG 714-2012 《血細(xì)胞分析儀檢定規(guī)程》。
 

　　本規(guī)范引用了下列文件：JJF 1001-1998 通用計量術(shù)語及定義；GZJLYZ00-002 校準(zhǔn)操作規(guī)范編寫規(guī)定。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本規(guī)范；凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本規(guī)范。
 

　　根據(jù)JJF 1071-2010 《國家計量校準(zhǔn)規(guī)范編寫規(guī)則》的要求，本規(guī)范架構(gòu)上包括封面、扉頁、目錄、引言、范圍、引用文件、術(shù)語和計量單位、概述、計量特性、校準(zhǔn)條件、校準(zhǔn)項目和校準(zhǔn)方法、校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá)、復(fù)校時間間隔、附錄幾個部分。
 

　　校準(zhǔn)環(huán)境條件：
 

　　1. 實驗室環(huán)境應(yīng)當(dāng)滿足儀器安裝的要求，不得存在強(qiáng)烈的機(jī)械振動和電磁干擾。2. 環(huán)境溫度：按照細(xì)胞計數(shù)儀說明書規(guī)定的溫度條件進(jìn)行。3. 相對濕度：按照細(xì)胞計數(shù)儀說明書規(guī)定的濕度條件進(jìn)行。4. 光照：避免陽光直射。5. 電源電壓：AC220 V±22 V，50 Hz/60 Hz 或相應(yīng)的直流電源。6. 大氣壓力：76 kPa～106 kPa。
 

　　校準(zhǔn)項目和校準(zhǔn)方法：
 

　　外觀要求
 

　　用目視并配合手動操作進(jìn)行檢查。儀器外表應(yīng)光滑平整，不應(yīng)有影響工作性能的機(jī)械損傷；顯示屏表面應(yīng)平整潔凈無劃痕，讀數(shù)清晰；開關(guān)及按鍵功能良好。儀器應(yīng)有以下標(biāo)識：名稱、型號、編號、生產(chǎn)廠家、出廠日期。
 

　　測試前準(zhǔn)備
 

　　開啟儀器，參照儀器使用說明書，使儀器達(dá)到最佳工作條件。根據(jù)客戶使用要求、被校準(zhǔn)儀器的日常工作模式和選取的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)類型選取合適的細(xì)胞測量模式。
 

　　空白值
 

　　取空白稀釋液、純水或蒸餾水進(jìn)行上樣計數(shù)，測量4次，記錄測量值并取其中的最高值作為空白值。
 

　　示值誤差
 

　　儀器的示值誤差以細(xì)胞濃度(總細(xì)胞濃度、活細(xì)胞濃度和死細(xì)胞濃度)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、細(xì)胞活率標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、顆粒直徑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測量值與標(biāo)準(zhǔn)值的誤差表示。根據(jù)被校準(zhǔn)儀器的日常工作模式選取合適濃度、比例和顆粒直徑的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)前上下顛倒30-50次左右從而保證充分混勻(瓶底無沉積物)。用移液器從充分混勻的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣本液體中間層吸取液體進(jìn)行上樣計數(shù)，測量5次，記錄測量值。
 

　　測量重復(fù)性
 

　　儀器重復(fù)性以細(xì)胞濃度(總細(xì)胞濃度、活細(xì)胞濃度和死細(xì)胞濃度)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、細(xì)胞活率標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、顆粒直徑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)10次測量值的實驗標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。根據(jù)被校準(zhǔn)儀器的日常工作模式選取合適濃度、比例和顆粒直徑的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)前上下顛倒30-50次左右從而保證充分混勻(瓶底無沉積物)。用移液器從充分混勻的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣本液體中間層吸取液體進(jìn)行上樣計數(shù)，測量10次，記錄測量值。
 

　　校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá)：
 

　　經(jīng)校準(zhǔn)后的細(xì)胞計數(shù)儀應(yīng)填發(fā)校準(zhǔn)證書，校準(zhǔn)證書應(yīng)符合JJF1071-2010中5.12的要求，參照附錄C給出校準(zhǔn)項目名稱、測量值以及擴(kuò)展不確定度。
 

　　本規(guī)范適用于基于顯微圖象原理、電阻抗原理進(jìn)行細(xì)胞濃度、細(xì)胞活率和顆粒直徑分析測量的細(xì)胞計數(shù)儀的校準(zhǔn)，其他類型的細(xì)胞計數(shù)儀可參照本規(guī)范進(jìn)行校準(zhǔn)。