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摘要本標準規(guī)定了水溶肥料中游離氨基酸含量測定的分光光度法的試驗方法。

  【儀表網 儀表標準】根據廣西肥料協會下達的《廣西肥料協會關于下達2022年第二批團體標準項目計劃的通知》精神,由廣西壯族自治區(qū)分析測試研究中心提出的《含氨基酸水溶肥料 游離氨基酸的測定—分光光度法》(征求意見稿)標準編寫工作已完成。依據《廣西肥料協會團體標準管理辦法(試行)》有關規(guī)定,現向社會公眾公開征求意見。
 
  本標準按照GB/T 1.1—2020《標準化工作導則 第1部分:標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。參考GB/T 8170 數值俢約規(guī)則與極限數值的表示和判斷;HG/T 2843 化肥產品 化學分析中常用標準滴定溶液、標準溶液、試劑溶液和指示劑溶液;NY/T 887 液體肥料 密度的測定;NY/T 1975 水溶肥中 游離氨基酸含量的測定等規(guī)程編制。
 
  本標準規(guī)定了水溶肥料中游離氨基酸含量測定的分光光度法的試驗方法。本標準適用于液體或固體水溶肥料中游離氨基酸含量的測定。
 
  方法原理:
 
  試樣用活性炭吸附蛋白質和消除色素干擾,用EDTA絡合金屬元素釋放氨基酸,氨基酸與茚三酮反應成藍色物質,在一定濃度范圍內,藍色溶液的吸光度與氨基酸量成正比例關系,用分光光度法測定出總的氨基酸含量,然后再除以矯正系數,最終得到游離氨基酸含量。
 
  儀器:
 
  1.通常實驗室儀器。2.紫外可見分光光度計。3.具塞比色管:10mL。4.玻璃比色皿:1cm。
 
  試樣的制備:
 
  固體樣品經多次縮分后,取出約100g,將其迅速研磨至全部通過0.50mm孔徑篩(如樣品潮濕,可通過1.00mm篩子),混合均勻,置于潔凈、干燥容器中。液體樣品經多次搖動后,迅速取出約200mL,置于潔凈、干燥的容器中。
 
  試樣溶液的制備:
 
  稱取試樣1g~5g(精確到0.001g),置于250mL容量瓶中,用水充分溶解后定容到刻度,搖勻后干過濾,棄去20mL初濾液。取約30mL濾液于小燒杯中,加入一勺(約2g)活性炭攪拌2min,靜置5min后干過濾,再用0.45微米的微孔濾膜過濾濾液。準確移取0.50mL濾液于50mL容量瓶中,加入1.0mL EDTA-Na溶液和1.0mL鹽酸溶液,用乙酸-乙酸鈉緩沖溶液定容,搖勻后干過濾,濾液備用待測。
 
  標準曲線的繪制:
 
  空白溶液的制備:用移液管依次吸取2.00mL蒸餾水、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗壞血酸溶液、1.50mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中,在100℃的沸水中加熱15min,取出冷卻至室溫,搖勻。
 
  標準曲線的繪制:用移液管吸取1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL氨基酸標準溶液分別置于4個50mL容量瓶中,用10%異丙醇溶液定容,搖勻。分別用移液管依次吸取2.00mL上述溶液、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗壞血酸溶、1.50 mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中,在100℃的沸水中加熱15min,取出冷卻至室溫,搖勻。以空白溶液為參比,于波長573nm出測定各吸光度。以氨基酸標準溶液的濃度為縱坐標,吸光度為橫坐標繪制標準曲線。
 
  樣品的測定:
 
  分別用移液管依次吸取2.00mL試樣溶液、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗壞血酸溶液、1.50mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中,在100℃的沸水中加熱15min,取出冷卻至室溫,搖勻。以空白溶液為參比,于波長573nm處測定樣品溶液吸光度,在標準曲線上查得相應的游離氨基酸質量。
 
  更多詳情請見附件。

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