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細(xì)胞凋亡檢測(cè)代謝途徑是什么？2018/06/28: 死體營(yíng)養(yǎng)型植物病原真菌在殺死植物細(xì)胞凋亡檢測(cè)獲取營(yíng)養(yǎng)前的能量來(lái)源和代謝途徑是什么？植物病原真菌引起的病害約占植物病害的70%—80%，每年在世界范圍內(nèi)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。該研究以其中的灰霉病菌為研究對(duì)象，這種植物病原真菌可感染1400多種植物，引起灰霉病，每年在造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，因此其致病機(jī)制備受學(xué)術(shù)界關(guān)注。該研究發(fā)現(xiàn)并系統(tǒng)闡述，糖異生（生物體將多種非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)變成葡萄糖或糖原的過(guò)程）在植物病原真菌的發(fā)育和致病過(guò)程中發(fā)揮了多種作用，糖異生的存在，可使病原菌應(yīng)對(duì)在侵染植物期間，自身葡萄糖和/或其它

蛋白酶抑制劑培養(yǎng)液的主要成份是什么？2018/06/26: 培養(yǎng)植物蛋白酶抑制劑要用組織培養(yǎng)液。不同植物要求不同。養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞也有區(qū)分。如果養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞一般需要小牛血清和特定的培養(yǎng)基。而且也需要CO2培養(yǎng)箱等設(shè)施。養(yǎng)酵母的話，一般的酵母發(fā)酵液就可以了。實(shí)驗(yàn)室常用的細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是氨基酸、葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽、維生素和微量元素等。為了維持穩(wěn)定的pH，培養(yǎng)液中一般有一個(gè)pH緩沖系統(tǒng)，同時(shí)常加入少量的酚紅作為pH指示劑。另外培養(yǎng)液中一般需要加入一定量的血清。培養(yǎng)液中的氨基酸除了13種細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的氨基酸外，往往加入一些非必需的氨基酸以促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)。在必需的

細(xì)胞培養(yǎng)需要的幾種試劑2018/06/21: 細(xì)胞培養(yǎng)試劑一般需要以下幾種1、水：細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈，不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水。2、PBS：主要用于免疫組化染色時(shí)組織或細(xì)胞的漂洗。3、*消化液：*的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)*的作用反應(yīng)不一樣。*分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時(shí)，*溶液的作用能力強(qiáng)。使用*時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低*的活性，所以配制*溶液

細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)污染處理2018/06/20: 細(xì)胞培養(yǎng)參考格式：1.內(nèi)容（含圖片）來(lái)源：原創(chuàng)、非原創(chuàng)（請(qǐng)說(shuō)明具體來(lái)源）2.細(xì)胞基本信息：名稱、種屬來(lái)源、凍存液、傳代數(shù)、傳代方法、培養(yǎng)基等。3.圖片：如污染前圖片、處理后圖片4.污染識(shí)別（含試劑盒檢測(cè)）、污染處理的過(guò)程。5.心得體會(huì)。也歡迎各位戰(zhàn)友積極討論、發(fā)表自己獨(dú)到的見(jiàn)解。小黑點(diǎn)：不隨細(xì)胞生長(zhǎng)而繁殖，可能是磷酸鈣沉淀，反之，可能是黑焦蟲(chóng)，鏡下會(huì)動(dòng)，會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)或重組細(xì)胞蛋白表達(dá)。貼壁的黑色碎片可能是細(xì)胞裂解碎片。霉菌污染：貼壁培養(yǎng)有絲狀白色，嚴(yán)重的的霉斑，絮狀，如果在發(fā)酵罐，白色的小球，

細(xì)胞凋亡檢測(cè)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑2018/06/14: 細(xì)胞凋亡檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是蛋白質(zhì)合成的主要加工廠，也是Ca2+重要的儲(chǔ)存庫(kù)。因此，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在維持細(xì)胞Ca2+離子的穩(wěn)定、蛋白的合成、加工中起到關(guān)鍵性作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)Ca2+離子失衡、錯(cuò)誤折疊或未折疊蛋白增多，則會(huì)引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的應(yīng)激反應(yīng)（endoplasmicreticulumstress,RES）。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)可減少細(xì)胞中蛋白質(zhì)的合成、增加蛋白正確折疊、維持Ca2+穩(wěn)態(tài)，但過(guò)度的應(yīng)激反應(yīng)會(huì)觸動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的凋亡信號(hào)，促使細(xì)胞凋亡。在真核生物體內(nèi)，未正確折疊蛋白反應(yīng)(unfoldedproteinrespons

分享細(xì)胞培養(yǎng)將從2D向3D轉(zhuǎn)換2018/06/12: 細(xì)胞培養(yǎng)3D系統(tǒng)的類型3D細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)（或支架）為細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境增添了第三維。它們有幾種主要的類型，包括來(lái)自天然材料的水凝膠支架，如細(xì)胞外基質(zhì)膠原蛋白。TAPBiosystems的RAFT（RealArchitecturefor3DTissue）技術(shù)正是基于膠原蛋白，它讓研究人員能夠開(kāi)展細(xì)胞生物學(xué)、藥物開(kāi)發(fā)和組織工程等研究。LifeTechnologies的Geltrex®和BDBiosciences的BDMatrigel™是從小鼠腫瘤中提取出的基底膜基質(zhì)，Sigma-Aldrich的MaxGel

細(xì)胞凋亡檢測(cè)可按哪些種類劃分？2018/06/07: 細(xì)胞凋亡檢測(cè)死亡根據(jù)其性質(zhì)、起源及生物學(xué)意義區(qū)分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個(gè)體和生存中起著非常重要的作用。它是細(xì)胞在一定生理?xiàng)l件下一系列順序發(fā)生事件的組合，是細(xì)胞遵循一定規(guī)律自己結(jié)束生命的自主控制過(guò)程。細(xì)胞凋亡具有可鑒別的形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)特征。在形態(tài)上可見(jiàn)凋亡細(xì)胞與周?chē)?xì)胞脫離接觸，細(xì)胞變園，細(xì)胞膜向內(nèi)皺縮、胞漿濃縮、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、細(xì)胞核固縮破裂呈團(tuán)塊狀或新月?tīng)罘植肌?nèi)質(zhì)網(wǎng)和細(xì)胞膜進(jìn)一步融合將細(xì)胞分成多個(gè)完整包裹的凋亡小體，凋亡小體后被吞噬細(xì)胞吞噬消化。在凋亡過(guò)程中細(xì)胞

細(xì)胞凋亡檢測(cè)死亡受體主導(dǎo)是什么？2018/06/05: 細(xì)胞凋亡檢測(cè)的外部死亡受體途徑死亡受體（DR）屬腫瘤壞死因子受體（TNFR）超家族，共同擁有富含Cys的胞外結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)死亡結(jié)構(gòu)域（DD）。當(dāng)死亡受體與特定的死亡配體結(jié)合后，其接收胞外的死亡信號(hào)，激活細(xì)胞內(nèi)的凋亡機(jī)制，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。目前所知的死亡受體—配體主要有:Fas（APO-1、CD95）—FasL（CD95L）TNFR1（DR1）—TNFTRAILR1（DR4）—TRAIL（APO-2L）TRAILR2（DR5）—TRAIL（APO-2L）DR3（APO-3、TRAMP）—TL1A等目前凋

細(xì)胞培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中污染原因的介紹2018/05/31: 污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。預(yù)防和避免污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一。一開(kāi)始就要十分重視，防止污染，否則會(huì)前功盡棄，不僅浪費(fèi)時(shí)間，而且浪費(fèi)人力、物力，甚至造成無(wú)法彌補(bǔ)的損失。細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的生物污染類型有7種，分別是細(xì)菌污染、支原體污染、原蟲(chóng)污染、黑膠蟲(chóng)污染、真菌污染、病毒污染以及非細(xì)胞污染。他們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)中污染的特點(diǎn)如下：1、細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。2、支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾

細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)常用設(shè)備2018/05/29: 細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備室的設(shè)備：?jiǎn)握麴s水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲(chǔ)品柜（放置未消毒物品）、儲(chǔ)品規(guī)（放置消毒過(guò)的物品）、包裝臺(tái)。配液室的設(shè)備：扭力天平和電子天平（稱量藥品）、PH計(jì)（測(cè)量培養(yǎng)用液PH值）、磁力攪拌器（配置溶液室攪拌溶液）。培養(yǎng)室的設(shè)備：液氮罐、儲(chǔ)品柜（存放雜物）、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱（-80℃）、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(tái)（書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)記錄）。必須放在無(wú)菌間的設(shè)備：離心機(jī)（收集細(xì)胞）、超凈工作臺(tái)、倒置顯微鏡、CO2孵箱（孵育培養(yǎng)物）、水浴鍋、三氧消毒

蛋白酶抑制劑分子生物學(xué)方法2018/05/29: 蛋白酶抑制劑這是一類利用細(xì)胞因子的基因探針檢測(cè)特定細(xì)胞因子基因表達(dá)的技術(shù)。目前所有*的細(xì)胞因子的基因均已克隆化，故能較容易地得到某一細(xì)胞因子的cDNA探針或根據(jù)已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探針。利用基因探針檢測(cè)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的方法多種多樣，常使用斑點(diǎn)雜交、Northernblot、逆轉(zhuǎn)錄PCR，細(xì)胞或組織原位雜交等。實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵在于制備高質(zhì)量的核酸探針和獲得合格的待測(cè)物(提取的mRNA樣品或細(xì)胞/組織標(biāo)本)。核酸探針是指一段用放射性同位素或其他標(biāo)記物(如*等)標(biāo)記并與目的基因互補(bǔ)的DN

分享如何選擇細(xì)胞培養(yǎng)試劑？2018/05/22: 細(xì)胞培養(yǎng)試劑能夠用于細(xì)胞的保存以及培養(yǎng)之中，是生物工程、醫(yī)藥研發(fā)以及農(nóng)畜牧行業(yè)等等多個(gè)領(lǐng)域進(jìn)行研究時(shí)經(jīng)常會(huì)使用到的一種工具。那么對(duì)于這些需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和研究的企業(yè)來(lái)說(shuō)，如何才能選擇到合適的細(xì)胞培養(yǎng)試劑呢？1.選擇*的培養(yǎng)試劑在購(gòu)買(mǎi)細(xì)胞培養(yǎng)試劑的時(shí)候品牌選擇很重要，因?yàn)?的企業(yè)對(duì)于培養(yǎng)試劑的質(zhì)量有著嚴(yán)格的把控，而且由于是專業(yè)提供培養(yǎng)試劑的企業(yè)，因此在試劑的功能研發(fā)和成分配制等方面也都有著豐富的經(jīng)驗(yàn)，并且有著極為良好的生產(chǎn)環(huán)境，可以確保為客戶提供品質(zhì)有保障的細(xì)胞培養(yǎng)試劑。2.選擇類型合適的培養(yǎng)試

細(xì)胞培養(yǎng)中包被液的理解2018/05/22: 在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)為了促進(jìn)原代細(xì)胞貼壁需要對(duì)使用的T-25/T-75等耗材進(jìn)行包被處理，常用的包被液有多聚賴氨酸和纖維黏連蛋白、明膠，其中ScienCell研究實(shí)驗(yàn)室研發(fā)的包被液就包含上述3種產(chǎn)品。其中包被液多聚賴氨酸是一種合成化合物，是帶正電荷的氨基酸，通過(guò)改變培養(yǎng)基質(zhì)表面的電極來(lái)促進(jìn)細(xì)胞貼壁。在細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛用于包被物促進(jìn)細(xì)胞貼壁。除了促進(jìn)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，包被液多聚賴氨酸包被后能提高原代細(xì)胞的存活率和促進(jìn)神經(jīng)突長(zhǎng)出。Sciencell出售的包被液多聚賴氨酸（PLL，貨號(hào)0403）是原液，分子量是70

細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件及步驟2018/05/15: 細(xì)胞培養(yǎng)是一種無(wú)菌操作技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無(wú)微生物污染和不受其它有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計(jì)原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔、空氣清新,干燥和無(wú)煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)工作包括：工作液配制、無(wú)菌操作(采樣)、溫育、無(wú)菌處理,細(xì)胞和用品貯存等。細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計(jì)實(shí)施原則一般是無(wú)菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動(dòng)的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。一、常用設(shè)施及設(shè)備(1)超凈工作臺(tái)：也稱凈化工作臺(tái),分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。(2)無(wú)菌操作間：一般由更衣間、緩部

分享常用細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法集錦2018/05/10: 1光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡(1)未染色細(xì)胞:凋亡細(xì)胞的體積變小、變形,細(xì)胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象,細(xì)胞凋亡晚期可見(jiàn)凋亡小體.貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮、變圓、脫落.(2)染色細(xì)胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等.凋亡細(xì)胞的染色質(zhì)濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質(zhì)分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態(tài)..細(xì)胞凋亡檢測(cè)磷脂酰*(Phosphatidylserine,PS)正常位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在細(xì)胞凋亡的早期,PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中(圖3).Annexin-V是一種分子量為35~36K

分享細(xì)胞培養(yǎng)染色體顯示2018/05/10: 傳代細(xì)胞培養(yǎng)染色體顯示法1．培養(yǎng)細(xì)胞：取處于指數(shù)生長(zhǎng)期、用較大瓶皿培養(yǎng)的、80％～90％匯合單層培養(yǎng)細(xì)胞。2．加秋水仙素：使用終濃度為0.02～0.8微克/毫升營(yíng)養(yǎng)液，溫箱繼續(xù)培養(yǎng)6～10小時(shí)；或用低溫封閉法：把培養(yǎng)細(xì)胞置于4℃條件下6～12小時(shí)后，再于37℃溫箱繼續(xù)培養(yǎng)6～10小時(shí)處理（加秋水仙素）。3．采集分裂細(xì)胞：可利用分裂中期細(xì)胞體變圓與底物附著不牢特點(diǎn)，此時(shí)手持培養(yǎng)瓶，左右反復(fù)橫向水平搖動(dòng)，令培養(yǎng)液在培養(yǎng)細(xì)胞表面反復(fù)沖刷。應(yīng)用此法可使90％的中期分裂細(xì)胞從瓶壁脫落，注意勿用力過(guò)猛，以防

蛋白酶抑制劑行為異常的分子機(jī)制2018/05/08: 來(lái)自蘭卡斯特大學(xué)的研究人員通過(guò)研究在癌癥樣的異常蛋白酶抑制劑中觀察到了特殊的代謝開(kāi)關(guān)，細(xì)胞能量代謝的改變或許是引發(fā)許多疾病的標(biāo)志，而這往往會(huì)使細(xì)胞從健康狀態(tài)轉(zhuǎn)變成為異常的代謝狀態(tài)。癌細(xì)胞的代謝開(kāi)關(guān)通常會(huì)通過(guò)有氧呼吸供能轉(zhuǎn)變?yōu)樘墙徒饣蛉紵咸烟莵?lái)供能，研究者表示，這些都是在酵母細(xì)胞中所觀察到的結(jié)果，當(dāng)然我們會(huì)在實(shí)驗(yàn)室中對(duì)這種現(xiàn)象進(jìn)行深入研究。對(duì)生物性振蕩感興趣的物理學(xué)家已經(jīng)對(duì)來(lái)自酵母細(xì)胞的數(shù)據(jù)進(jìn)行了深入的研究，同時(shí)研究者也利用數(shù)理方程對(duì)此進(jìn)行了描述。這項(xiàng)研究中，研究者通過(guò)對(duì)酵母細(xì)胞中能量產(chǎn)生的動(dòng)力

細(xì)胞培養(yǎng)染色體顯示法的介紹2018/05/03: 1．細(xì)胞培養(yǎng)：取處于指數(shù)生長(zhǎng)期、用較大瓶皿培養(yǎng)的、80％～90％匯合單層培養(yǎng)細(xì)胞。2．加秋水仙素：使用終濃度為0.02～0.8微克/毫升營(yíng)養(yǎng)液，溫箱繼續(xù)培養(yǎng)6～10小時(shí)；或用低溫封閉法：把培養(yǎng)細(xì)胞置于4℃條件下6～12小時(shí)后，再于37℃溫箱繼續(xù)培養(yǎng)6～10小時(shí)處理（加秋水仙素）。3．采集分裂細(xì)胞：可利用分裂中期細(xì)胞體變圓與底物附著不牢特點(diǎn)，此時(shí)手持培養(yǎng)瓶，左右反復(fù)橫向水平搖動(dòng)，令培養(yǎng)液在培養(yǎng)細(xì)胞表面反復(fù)沖刷。應(yīng)用此法可使90％的中期分裂細(xì)胞從瓶壁脫落，注意勿用力過(guò)猛，以防多量非分裂細(xì)胞脫落影響觀

細(xì)胞凋亡檢測(cè)用途及常見(jiàn)問(wèn)題解答2018/04/17: 細(xì)胞凋亡檢測(cè)用途1.用于腫瘤細(xì)胞和組織在內(nèi)的不同種類病理標(biāo)本研究2.應(yīng)用于臨床診療，新藥研制、生物制品開(kāi)發(fā)、腫瘤放*、以及從促凋亡角度探索腫瘤的基因治療；3.對(duì)相關(guān)疾病的早期發(fā)現(xiàn)、放*的療效評(píng)價(jià)具有舉足輕重的地位。細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法非常多樣，根據(jù)具體情況可選用對(duì)應(yīng)檢測(cè)方法。以下每一種方法都有很詳細(xì)的步驟說(shuō)明，內(nèi)容較多。1.熒光探針雙標(biāo)記法2.形態(tài)學(xué)檢測(cè)法3.DNAladder法4.AnnexinV/PI雙染色法5.磷脂酰*外翻分析（AnnexinV法）6.TUNEL法7.Caspase-3活性檢測(cè)

細(xì)胞培養(yǎng)的基本概念及方式2018/04/12: 細(xì)胞培養(yǎng)方式大致可分為兩種（圖2-25）：一種是群體培養(yǎng)（massculture），將含有一定數(shù)量細(xì)胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中，讓細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，匯合（confluence）后形成均勻的單細(xì)胞層；另一種是克隆培養(yǎng)（clonalculture），將高度稀釋的游離細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，各個(gè)細(xì)胞貼壁后，彼此距離較遠(yuǎn)，經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)增殖每一個(gè)細(xì)胞形成一個(gè)細(xì)胞集落，稱為克隆（clone）。一個(gè)細(xì)胞克隆中的所有細(xì)胞均來(lái)源于同一個(gè)祖先細(xì)胞。此外，為了制取細(xì)胞產(chǎn)品而設(shè)計(jì)了轉(zhuǎn)鼓培養(yǎng)法，使用大容量的圓培養(yǎng)瓶，在培養(yǎng)過(guò)程中不斷地轉(zhuǎn)

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