農(nóng)藥殘留速測(cè)試劑說明書
產(chǎn)品名稱：農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)試劑
執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：GB/T 5009.199-2003
產(chǎn)品組成：*酯酶、顯色劑、底物與緩沖試劑。
【檢測(cè)原理】
根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制*酯酶的活性原理，如果蔬菜的提取液中不含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留或殘留量低，酶的活性就不被抑制，實(shí)驗(yàn)中加入的底物就能被酶水解，水解產(chǎn)物與加入的顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色或水解產(chǎn)物本身有顏色，如果蔬菜的提取液里含有農(nóng)藥并殘留量較高時(shí)，酶的活性被抑制，基質(zhì)就不被水解，當(dāng)加入顯色劑時(shí)就不顯色或顏色變化很小，用分光光度計(jì)測(cè)定吸光值隨時(shí)間的變化瑞安開鎖，計(jì)算出抑制率，就可以判斷蔬菜中含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的情況。
對(duì)部份常見農(nóng)藥檢測(cè)靈敏度：
A 有機(jī)磷類：
、、、、、、殺撲磷等（靈敏度0.5-5mg/kg）；
B 氨基甲酸酯類：
、、丙硫、丁硫、、仲丁威、、殘殺威、、等（靈敏度0.2-2.5mg/kg）
一、試劑儲(chǔ)存及包裝規(guī)格試劑配制前冷凍保存有效18個(gè)月，1-5℃冷藏12個(gè)月，常溫2個(gè)月。
包裝規(guī)格：500樣/盒【5包，每包100樣獨(dú)立包裝。每包包含：酶、顯色劑、底物各1瓶。緩沖試劑10袋獨(dú)立包裝】
二、試劑配制
緩沖液：取一包緩沖劑用500mL蒸餾水攪拌溶解后常溫備用。
底 物：取一瓶加入10mL蒸餾水搖勻溶解，配制后1-5℃冷藏保存。
酶 液：取一瓶加入10mL緩沖液搖勻溶解，配制后1-5℃冷藏保存。
顯色劑：取一瓶加入10mL緩沖液搖勻溶解，配制后1-5℃冷藏保存。
三、樣液制備
1、選取有代表性的果蔬除去泥土，葉菜類取葉片/瓜果取皮，剪成1cm見方大小。
2、葉菜類稱取2g（瓜果類取4g），放入樣品瓶后加10mL緩沖液，振蕩2分鐘。
3、倒出提取液澄清3-5分鐘(渾濁或葉綠素多的樣液則直接用濾紙過濾)。
四、檢測(cè)步驟
1、儀器開機(jī)后進(jìn)入待測(cè)界面預(yù)熱。
2、取一支試管加2.5mL緩沖液做空白對(duì)照，其余試管則分別加2.5mL樣液。
3、分別加入100μL酶、100μL顯色劑，振蕩后37℃恒溫培養(yǎng)10分鐘。（如果無條件加溫培養(yǎng)也可在20℃以上的環(huán)境中放置15分鐘）
4、再分別加入100μL底物振蕩后倒入比色皿，立即放入儀器檢測(cè)（對(duì)照放第1通道）。
5、儀器自動(dòng)完成檢測(cè)程序并打印出檢測(cè)結(jié)果。
五、結(jié)果判定
抑制率＜50%時(shí)為合格；抑制率≥50%時(shí)農(nóng)藥殘毒標(biāo)。建議對(duì)結(jié)果為45-55%的進(jìn)行雙樣復(fù)測(cè)。
六、提示說明
1、試劑應(yīng)避免交叉污染，倒出后的試劑不可再倒回瓶?jī)?nèi)。
2、試劑使用前應(yīng)搖勻，從冰箱取出的液體試劑應(yīng)在室溫放5分鐘以上才使用。
3、檢測(cè)室周圍不得使用農(nóng)藥、滅蚊劑等藥物，以免空氣中藥物分子影響試劑。
4、蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁中，含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時(shí)，可采取整株（體）浸提取樣。
農(nóng)藥殘留速測(cè)試劑
建立和實(shí)施農(nóng)產(chǎn)品的市場(chǎng)準(zhǔn)入制度是保障食品安全的一項(xiàng)重要工作，蔬菜中的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)是其中一個(gè)重要環(huán)節(jié)，衛(wèi)生部食品衛(wèi)生檢測(cè)為此頒布了標(biāo)準(zhǔn)《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量快速檢測(cè)》(即GB/T5009.199-2003)。農(nóng)殘速測(cè)試劑是廣州綠尚實(shí)驗(yàn)儀器有限公司為該標(biāo)準(zhǔn)方法制備的配套試劑，酶活性和對(duì)農(nóng)藥敏感性等指標(biāo)均達(dá)到或過了標(biāo)準(zhǔn)的要求，可以在各種型號(hào)的農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀(分光光度法)上使用，具有穩(wěn)定性好、靈敏度高和使用方便等特點(diǎn)，適合各農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)部門和檢測(cè)站使用。檢測(cè)原理
在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)動(dòng)物性神經(jīng)介質(zhì)*酯酶正常功能有抑制作用，從而達(dá)到殺蟲目的，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常條件下，*酯酶(ChE)催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物(碘化硫代乙酰*ATCI或碘化硫代丁酰*BTCI)水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑(二硫代二硝基苯甲酸DTNB)發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)或農(nóng)殘測(cè)試儀在412nm處測(cè)定吸光度的變化值(△A)，計(jì)算出抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的存在。
酶活力:空白對(duì)照1分鐘(3分鐘)吸光度變化值(ΔΑ0)在0.15-0.3(0.3-0.8)之間。
使用方法
標(biāo)準(zhǔn)方法GB/T 5009.199-2003操作，或根據(jù)農(nóng)殘速測(cè)試劑的使用說明進(jìn)行測(cè)試。
檢測(cè)靈敏度
使用農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液對(duì)農(nóng)殘速測(cè)試劑的低檢測(cè)限進(jìn)行多次測(cè)試，通過了質(zhì)量檢驗(yàn)測(cè)試中心(廣州)等檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的檢測(cè)驗(yàn)證，結(jié)果符合標(biāo)準(zhǔn)，具體請(qǐng)參照檢測(cè)報(bào)告。
農(nóng)藥殘留速測(cè)試劑酶抑制率法對(duì)部分農(nóng)藥的檢出限
| 農(nóng)藥中文名稱 | 英文通用名稱 | 檢出限(mg/kg) |
| 滅多威 | Thiodicarb | 0.8 |
| Omethoate | 0.4 | |
| Parathion | 0.8 | |
| isofenphos-methyl | 2.0 | |
| Phoxim | 0.2 | |
| Methamidophos | 0.3 | |
| Dichlorovos | 0.1 | |
| 丁硫 | carbosulfan | 0.2 |
| malathion | 0.5 | |
| Trichlophon | 0.1 | |
| Furadan | 0.1 | |
| 樂果 | Dimethoate | 0.8 |
保存條件及保質(zhì)期
農(nóng)殘速測(cè)試劑穩(wěn)定性較好，可以常溫運(yùn)輸或郵寄，長(zhǎng)期存放應(yīng)在4℃冰箱中，保質(zhì)期為12個(gè)月;室溫或常溫保存時(shí)，保質(zhì)期為3~6個(gè)月。
包裝規(guī)格
標(biāo)準(zhǔn):180樣/盒;300樣/盒;500樣/盒。
行業(yè)標(biāo)準(zhǔn):500樣/盒(適用于國(guó)內(nèi)有農(nóng)藥殘留速測(cè)儀和分光光度檢測(cè)儀)。
農(nóng)藥殘留速側(cè)試劑盒國(guó)標(biāo)500樣部分使用單位：
陜西略陽縣農(nóng)檢中心
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