特點(diǎn)：
1.即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供病毒樣品。
2.靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。
4.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
5.本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 元胡LAMP鑒定試劑盒 |
| 英文名稱(chēng) | Rhizoma corydalis |
| 規(guī)格 | 50次 |
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
PCR反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
用于鑒別耐的弧菌對(duì)杞櫞酸鹽和無(wú)機(jī)銨的利用能力。（鑒定霍亂弧菌） 1%NaCl西蒙氏杞櫞酸鹽生化鑒定管 20支/盒
用于鑒別耐的弧菌利用糖源的能力。 1%NaCl蔗糖生化鑒定管 20支/盒
用于樣品的稀釋。（GB 4789.13-2010） 1%蛋白胨水 250g
用于白色念珠菌芽管試驗(yàn)的培養(yǎng)(2010版中國(guó)藥典) 1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 250g
用于白色念珠菌芽管試驗(yàn)的培養(yǎng) 1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 100g
每支添加于1000mL的1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基（021105）中. 1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基配套試劑 10支/盒
用于苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn). 10% FeCl3試劑(苯丙氨酸試劑) 10ml/支
用于弧菌的耐鹽試驗(yàn)。 10%NaCl胨水生化鑒定管 20支/盒
用于金黃色葡萄球菌的多管發(fā)酵法測(cè)定及增菌培養(yǎng)。 10%胰蛋白胨大豆肉湯 90mmX20個(gè)
用于金黃色葡萄球菌的多管發(fā)酵法測(cè)定及增菌培養(yǎng)。 10%胰蛋白胨大豆肉湯 225ml/X10袋
用于金黃色葡萄球菌的多管發(fā)酵法測(cè)定及增菌培養(yǎng)(GB/T4789.10－2008)。 10%胰酪胨大豆肉湯 250g
用于弧菌的耐鹽試驗(yàn)。 11%NaCl胨水生化鑒定管 20支/盒
用于弧菌的耐鹽試驗(yàn)。 2%NaCl胨水生化鑒定管 20支/盒
嗜二氧化碳菌培養(yǎng)：每袋用于2.5L厭氧體積。 2.5LCO2產(chǎn)氣劑 10袋/包
使用2.5L厭氧產(chǎn)氣劑一袋；可裝12個(gè)培養(yǎng)皿。 2.5L密封培養(yǎng)灌 19.7x13.5x9.5cm
元胡LAMP鑒定試劑盒微需氧菌培養(yǎng)：每袋用于2.5L厭氧體積。 2.5L微需氧產(chǎn)氣劑 10袋/包
嚴(yán)格厭氧菌培養(yǎng)：每袋用于2.5L厭氧體積。 2.5L厭氧產(chǎn)氣劑 10袋/包
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
