產(chǎn)品名稱 | SK-MEL-3人惡性黑色素瘤細(xì)胞 | 貨號 | AXB6994 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | SK-MEL-3 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候，這時細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠β防御素2(DEFB2)ELISA試劑盒 ，英文名： DEFB2 ELISA Kit
Rabbit immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit 兔子免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒
ELISA 小鼠骨保護(hù)素(mouse OPG) 48T/96T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-11ELISAKit大鼠白介素11規(guī)格：48T/96T
通用型馬原蟲性腦脊髓炎(EquineProtozoaMyeloencephalitis)試劑盒20次
ELISAKitVEGFR-1大鼠血管
小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒 ，英文名： HBsAb ELISA Kit
小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA檢測試劑盒MousegranzymesA,Gzms-AELISAKit 96T/48T
人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)免疫試劑盒 Human KAF/AR ELISA Kit
RatAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白H3-K36乙酰化檢測試劑盒10/2
小鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-3 ELISA Kit
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA檢測試劑盒Ratsolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit 96T/48T
人T淋巴細(xì)胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗體免疫試劑盒 Human HTLV-Ⅰ/II aibody ELISA kit
英文名稱MouseNeuroophin-3，-3ELISAkit小鼠神
SK-MEL-3人惡性黑色素瘤細(xì)胞豬載脂蛋白B(Apo-B)ELISA試劑盒
Human sarcomeric - actinin alpha (SM Actinin- a) ELISA Kit 人橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒
Rabbitsolubleclusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforApoA1(Humanai-apolipopro
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達(dá)效率。
