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Caspase-8活性測(cè)定試劑盒

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面議
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  • 型號(hào)
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時(shí)間2022-05-11
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限8
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9988
  • 人氣值256127
產(chǎn)品標(biāo)簽

Caspase-8活性測(cè)定試劑盒

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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。


上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國(guó)科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!


公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請(qǐng)退換,有技術(shù)疑問可隨時(shí)給于解答,一對(duì)一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。






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貨號(hào)FS-X9734
Caspase-8活性測(cè)定試劑盒正在熱銷的產(chǎn)品:Integrin beta 2/CD18/LFA-1 整合β2抗體羅丹明B 高純級(jí),≥95.0%(HPLC)
Phospho-CD18 (Ser756/Thr758/759) 化整合β2抗體樹脂天青 90%
CD184/CXC-R4 表面趨化因子受體4抗體羅丹明6G AR
CD19 CD19抗體樹脂天青 for cell culture,≥9
Caspase-8活性測(cè)定試劑盒 產(chǎn)品詳情

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

中文名稱:Caspase-8活性測(cè)定試劑盒

英文名稱:Caspase-8 Activity colorimetric assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T

貨號(hào):FS-X9734

產(chǎn)品介紹:

本試劑盒適用于檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織、細(xì)胞Caspase-8活性。Caspase-8也稱FLICE、MACH 或Mch5,通常以酶原的形式存在,凋亡時(shí)被激活,被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程的上游caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介導(dǎo)的凋亡過(guò)程中Caspase-8被激活形成二聚體,進(jìn)而激活下游Caspase-4,6,9,10。測(cè)定原理基于Caspase-8特異水解多肽底物IETD-pNA(Ile-Glu-Thr-Asp-p-nitroanilide),釋放的游離硝基pNA在405nm有大吸光度。采用可見光光度比色法測(cè)定pNA而得到Caspase活性。

儲(chǔ)存條件:按標(biāo)簽標(biāo)示分別保存試劑,有效期1年

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

opiorphin(opiorphin)英文名:opiorphin BTBD6蛋白抗體包裝5g

N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)英文名:AcSDKP BMP內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝25g

N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)英文名:NAG 肝病NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8抗體包裝5g

N端前腦鈉(NT-proBNP)英文名:NT-proBNP 骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切抗體包裝1g

NANOG同源域蛋白(NANOG)英文名:NANOG 骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體包裝5g

NAD依賴性蛋白脫乙酰sirtuin-1(SIRT1)英文名:SIRT1 微管蛋白β輔助因子D抗體包裝25g

NADPH氧化1(NOX1)英文名:NOX1 鈣粘蛋白相關(guān)蛋白受體BTR1抗體包裝5g

M型肌激(CKM)英文名:CKM 有絲分裂蛋白BUB3抗體包裝1g

MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)英文名:MAPKAPK2 p60TRP蛋白抗體包裝5g

L選擇(L-Selectin/CD62L)英文名:L-Selectin/CD62L 博萊霉解抗體包裝1g

L-乳脫氫A鏈(LDH-A)英文名:LDH-A 短蛋白聚糖抗體包裝5g

L解(PAL)英文名:PAL BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝10MG

Klotho(Klotho)英文名:Klotho 巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體包裝100g

KI-67抗原(MKI67)英文名:MKI67 堿性亮拉鏈蛋白BZW1抗體包裝25g

I型膠原蛋白(COL-1)英文名:COL-1 骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體包裝5g

ASH1蛋白抗體肝核因子1β(HNF1β)CWHM-12是αV整聯(lián)蛋白的有效抑制劑,抑制αvβ8,αvβ3,αvβ6和αvβ1的 IC50 值分別為0.2,0.8,1.5,1.8 nM。
Caspase-8活性測(cè)定試劑盒青霉 2-乙可溶性血管生成受體激2

金針菇(毛柄、冬菇) 5-氨基鄰甲酚硫酸鹽可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白

大腸埃希 4-氨基-3-吡啶可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物

牛瘟病 二(2-甲基-2-烯酸)2-羥基-1,3-酯可溶性腫瘤壞死因子受體1

芽孢桿 5-氟-2-甲氧基苯可溶性腫瘤壞死因子受體1

異常漢遜酵母 4-溴-2,6-二氟可溶性腫瘤壞死因子受體2

蘇云金芽孢桿錫盧亞種 N-(叔丁氧基羰基)-對(duì)甲苯磺酰可溶性腫瘤壞死因子受體2

甲基桿屬 N-甲基-2-氟苯可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體

根瘤 氫氧化鉛可溶性腫瘤壞死因子樣凋亡微弱誘導(dǎo)劑

寄生曲霉 (R)-(+)-二氨基烷可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體

偽假蒼黃 異辛酸鈉可替丁

多主葡萄殼 4-芐克拉拉蛋白

無(wú)二酸檸檬酸桿 4-基-1-羧酸乙酯空腸彎曲黏附蛋白

木賊鐮孢 2-氟-5-空泡相關(guān)蛋白A

香菇 2-氟-4-羥基苯鹽酸鹽狂犬病抗原
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)


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