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  • Hoechst33342染色液價格

Hoechst33342染色液價格

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  • 型號
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-09-08
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限8
  • 實名認證已認證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9976
  • 人氣值247034
產(chǎn)品標簽

Hoechst33342染色液

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上海邦景實業(yè)有限公司(Shanghai Bangjing Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學,暨南大學,南京工業(yè)大學,曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


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貨號BJ-01R3530
Hoechst33342染色液價格的公司*:
TIMM17A 線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位抗體 規(guī)格: 0.2mlCLDND2 膜蛋白CLDND2抗體 規(guī)格: 0.2mlH1N1 Hemagglutinin 1/HA probe 甲型毒凝素抗體 規(guī)格: 0.2mlClaudin 11/OSP(Oligodendrocyte Marker) 少突膠質(zhì)細胞跨膜蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlLin28
Hoechst33342染色液價格 產(chǎn)品詳情

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1)     轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

公司產(chǎn)品具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱:Hoechst33342染色液價格

貨號:BJ-01R3530

規(guī)格:10ml

分類:細胞染色

儲存條件:—20℃,避光,6個月

用途:細胞周期分析、活細胞染色等

注意事項:Hoechst33342是一種熒光染料,可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。染色染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色,也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。

注意事項:

1、盡注意無菌操作,避免污染。

2、避免反復凍融。

3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

標準溶液的配制:

1.直接配制法    對于純凈的物質(zhì)(稱做基準物質(zhì))可準確進行稱量,用蒸餾水溶解后,轉(zhuǎn)移到一定容積的容量瓶中稀釋至標線,溶液的準確濃度可以直接計算出來。溶質(zhì)的純度、性質(zhì)等對濃度有較大影響,為此,對用來直接配制標準溶液用的基準物質(zhì)必須具備以下條件:

(1)物質(zhì)的純度要高,含量不得低于99.9%,雜質(zhì)的含量應當少到可以忽略的程度。

(2)物質(zhì)的分子組成應與其化學式*符合,包括結(jié)水合物中的結(jié)品水含量也必須與其化學式相符合。如硼砂Na2B4O7·10H2O等。

(3)性質(zhì)穩(wěn)定,貯蔵時應不發(fā)生變化,不易吸收空氣中的水分、二氧化碳等氣體而改變其成分,不易風化潮解和被空氣氧化,烘干時不易分解等。此外最好使用分子量較大的基準物質(zhì)以減小稱量誤差。

2.間接配制法    凡不符合基準物質(zhì)條件的物質(zhì),可先配制成近似所需濃度的溶液,再用基準物質(zhì)溶液或能與其發(fā)生定量反應的標準溶液進行滴定,求其準確濃度,這種通過滴定來確定準確濃度的操作叫做“標定”。間接法配制近似濃度溶液時不需用分析天平稱量和容量瓶配制,可用臺秤、量筒等器皿。將稱好的物質(zhì)轉(zhuǎn)移到干凈的試劑瓶中,先加少量蒸餾水將其溶解,繼續(xù)用量筒加蒸餾水至需要量即可。由于大多數(shù)試劑不符合基準物的條件,故間接法配制標準溶液是經(jīng)常的。如固體NaOH因易吸收空氣中的水分而潮解和吸收CO2使表面變質(zhì);濃鹽酸因易揮發(fā)而無法準確稱量;不易得到分析純級的試劑等,這些物質(zhì)的標準溶液須用間接法來配制,經(jīng)標定后再做標準溶液使用。

2.png 

標準溶液的標定:

1.用基準物質(zhì)標定法

(1)多次稱量法    用減重法精密稱取幾份(如2~3份)基準物質(zhì),分別倒入編號的干凈錐形瓶(或燒杯)內(nèi),各加少量蒸餾水溶解,再加指示劑后分別用待標定溶液滴定至等當點,各自記錄所消耗待標定溶液的體積,結(jié)合基準物質(zhì)的重量分別算出溶液的準確濃度,最后取平均值做為標準溶液的濃度。

(2)移液管法    精密稱取一份基準物質(zhì),在干凈的小燒杯內(nèi)加少量蒸餾水溶解,順玻棒全部轉(zhuǎn)移到已校正好的容量瓶中,多次沖洗燒杯洗液并入容量瓶中,最后配成一定體積的溶液,混勻。每次滴定用配套的移液管吸取并轉(zhuǎn)移至錐形瓶中,加指示劑后用待標定溶液滴定至等當點,每次做好記錄,根據(jù)所消耗待標定溶液的體積,結(jié)合基準物質(zhì)的重量,分別算出溶液的準確濃度取平均值做為標準溶液的濃度。

2.比較法標定    如果待標定溶液能與某標準溶液進行反應,可吸量一定體積的某標準溶液,用待標定溶液滴定,或吸量一定體積的待標定溶液,用某標準溶液滴定。根據(jù)兩溶液所消耗的毫升數(shù)及某標準溶液的濃度,按N1V1=N2V2式可以計算出待標定溶液的準確濃度。這種用標準落液來測定待標定溶液準確濃度的過程稱為“比較法”標定。如果某標準溶液的濃度由于某些原因不夠準確時,就會直接影響待標定溶液濃度的準確性,顯然比較法不如用基準物質(zhì)直接標定的方法精確,但比較法簡便易行。

標定完畢,蓋緊標準溶液試劑瓶塞,瓶簽上注明標準溶液名稱、準確濃度和日期等。

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