試劑配制
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
服務(wù)：
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Hamster cathepsin K (cath-K) ELISA Kit |
貨號 | YS-H10117 |
?
樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
紫莖女貞苷C;Ligupurpurosi 訂購|咨詢 規(guī)格： 10mg
芝素;Sesamin 607-80-7 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
野馬追內(nèi)酯A;Eupalilide 877822-41-8 訂購|咨詢 規(guī)格： 10mg
乙酸酯;Bornyl acetate 20347-65-3 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
異土木香內(nèi)酯;Isoalantolact 470-17-7 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
遠(yuǎn)志皂苷元;Tenuigenin 2469-34-3 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
新藤黃酸;neogambogic aci 93772-31-7 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
烏金甙; 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
脫水羊藿素;Anhydroicarit 38226-86-7 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
酚-3-O-β-D-槐糖苷;Kaem 19895-95-5 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
三葉豆紫檀苷;Trifolirhizin 6807-83-6 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
酚;Kaempferol 520-18-3 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
人參皂苷Rh1;Ginseside 63223-86-9 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷;Api 578-74-5 訂購|咨詢 規(guī)格： 10mg
10-羥基癸烯酸;10-Hydroxy- 14113-05-4 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA檢測試劑盒MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞皺褶假絲酵母 Candida rugosa
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae微小威斯桿菌 Weissella minor
暗產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces phaeochromogenesEBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞
A673(人橫紋肌瘤細(xì)胞)泡盛曲霉 Aspergillus awamori
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae橘橙鏈霉菌 Streptomyces aurantiacus
盤孢菌 Gloeosporium sp.Yeast Protein Extraction Reagent/酵母蛋白抽提試劑
人肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基圓弧青霉 Penicillium cyclopium
HUM, 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞美味側(cè)耳 Pleurotus sapidus
鼠桿菌 Lactobacillus murinus豚鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞
螢光假單胞桿菌 Pseudomonas fluorescensHK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞
HA(人羊膜細(xì)胞)煙色紅曲 Monascus fuliginosus
酒假絲酵母 Candida kefyr大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarumL1210(小鼠白血病細(xì)胞)
M-NFS-60 (小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性)泡盛曲霉 Aspergillus awamori
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis異型德克酵母 Dekkera anomala
鏈孢囊菌 Streptosporangium sp.HCC827(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)
操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
