試劑配制
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
服務(wù)：
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat 5 hydroxytryptamine (5-HT) ELISA Kit |
貨號 | YS-R10720 |
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樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
遠(yuǎn)志山Ⅲ 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
天然 5 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
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大鼠5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilusMRC5/成纖維細(xì)胞
佛羅里達(dá)側(cè)耳 Pleurotus florida少根根霉 Rhizopus arrhizus
小鼠肺細(xì)胞褐環(huán)牛肝菌 Suillus leteus
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基小鼠巨噬細(xì)胞
無花果曲霉 Aspergillus ficuum人胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
麥芽糖假絲酵母 Candida maltosa釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
HNE2, 人鼻咽細(xì)胞系豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
中國臺灣白面酵母 Saccharomyces pekaYAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)
香菇 Lentinula edodes炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
人淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞)
異常漢遜酵母 Hansenula anomala釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
球孢白僵菌 Beauveria bassiana尖孢鐮刀菌棉花專化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum
FO(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)俄勒岡地鼠
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
東北擬青霉蛹蟲草 Cordyceps millitaris
操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
