參數規格：
產品名稱：曲霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
產品分類：熒光定量PCR
貨號：CP101017
產品規格：50次
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
維生素B6（標準品）vitamin B6質量規格：HPLC≥99%，標準品 HumanUlasensitivityi-iodothyronine，u-T3ELISAKit人高敏狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒規格：96T/48T 熱休克蛋白70(HSP70)ELISA試劑盒 ，英文名： HSP70 ELISA Kit
(+)-5-反式氯前列醇(+)-5-trans Cloprostenol質量規格：美國進口 小鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 ，英文名： EPO ELISA Kit PVELISA試劑盒魚卵黃高1蛋白規格：96T/48T
(+/-)-氯前列醇鈉鹽水合物(+/-)-Cloprostenol salt hydrate質量規格：美國進口 大鼠過敏/補體片斷4a(C4a)ELISA檢測試劑盒RatComplemefragme4a,C4aELISAKit 96T/48T HumanAicenomereAibody,ACA/CENPELISA試劑盒人抗著絲點抗體(ACA/CENP)ELISA試劑盒規格：96T/48T
(+)-氯前列醇(+)-Cloprostenol質量規格：美國進口 人補體1q(C1q)試劑盒 Human Compleme 1q ELISA Kit HumanBlockingaibody，BAELISAKit人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒規格：96T/48T
生物素基妥布霉素酰胺質量規格：美國進口Biotinyl Tobramycin Amide Rat6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISA試劑盒大鼠6同前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒規格：96T/48T 大鼠T細胞活化核因子5(NFAT5)試劑盒 Rat nuclear factor of activated T-cells 5,NFAT5 ELISA Kit
妥布霉素硫酸鹽質量規格：美國進口Tobramycin sulphate 小鼠W1誘導信號通道蛋白1(WISP1)ELISA試劑盒 ，英文名： WISP1 ELISA Kit CLIAKitforsRANKL(Mousesolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand)ELISAKit小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基規格：48T/96T
氘化妥布霉素質量規格：美國進口Tobramycin Deuterated 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA檢測試劑盒Human2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit 96T/48T 人血液纖維蛋白原(fibrinogen)比濁法定量檢測試劑盒20
鹽酸拓撲替康標記 d6質量規格：美國進口Topotecan Labeled d6 大鼠基質金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒 Rat maix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA kit ELISAKitLPAg人軍團菌抗原規格：48T/96T
曲霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒鼠疫桿菌(YP)熒光-PCR法檢測試劑盒
志賀氏菌(SH)熒光-PCR法檢測試劑盒
霍亂弧菌O1(VC O1)熒光-PCR法檢測試劑盒
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
