微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無(wú)菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

3,4,5-氧基苯甲酸 99%分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Nox3/NADPH oxidase 3  有絲分裂氧化2抗體

硫脲 ACS, ≥99.0% 99%Anti-NOX4/NADPH oxidase 4  NADPH氧化NOX家族的成員4抗體

硝酸氧鋯 水合物 AR,99.5%和厚樸酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Nanog  胚胎干關(guān)鍵蛋白抗體

二氧化鋯 AR,99.0%楊梅素 97%Anti-NAIF1 protein  核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1

氫氧化鋯 97%楊梅素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%Anti-Natrexone  抗納曲酮抗體IgG

硝酸氧鋯 99%厚樸酚  ≥98% (HPLC)Anti-NAP1/NAP1L1  核小體組裝蛋白1抗體

氯化鋯 98%楊梅苷 98%Anti-NB3/CNTN6  神經(jīng)NB3特定蛋白抗體

堿式碳酸鋯(IV) ≥40% ZrO2 basis 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%Anti-P95/NBS1  DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體

納地青霉蘆薈甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97%兔β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗體Rabbit Anti-MK IgM/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的兔抗猴IgM

10-脫乙酰巴卡丁 III 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥95%兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)免疫試劑盒酪蛋白激2相互作用蛋白1抗體Rabbit Anti-MK IgM/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗猴IgM

多烯紫杉 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99%兔S100-A5蛋白(S100A5)免疫試劑盒CD40L抗體Rabbit Anti-MK IgM/APC  APC標(biāo)記的兔抗猴IgM

多烯紫杉 98%兔P物質(zhì)受體(SP-R)免疫試劑盒α-s1酪蛋白抗體Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgM

大黃素 ≥90% (HPLC)兔p物質(zhì)(SP)免疫試劑盒CIDEB抗體Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗猴IgM

 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%兔p53(p53)免疫試劑盒高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗猴IgM

紫杉 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98% 兔N端前腦鈉素(NT-proBNP)免疫試劑盒信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞7A抗體Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗猴IgM

紫杉 98%兔NADPH氧化1(NOX1)免疫試劑盒凋亡抑制因子抗體Rabbit Anti-Mink IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記的兔抗水貂IgG

白藜蘆 99%兔C肽(C-Peptide)免疫試劑盒D型產(chǎn)氣莢膜梭菌抗體Rabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗水貂IgG

丹參酮IIA磺鈉 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%兔CD8分子(CD8)免疫試劑盒降鈣素抗體Rabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗水貂IgG

虎杖甙  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%兔CD4分子(CD4)免疫試劑盒20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框14抗體Rabbit Anti-Mink IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗水貂IgG

伍德合金 SU兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)免疫試劑盒結(jié)締組織生長(zhǎng)因子抗體Rabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗水貂IgG

代叔丁 99%兔ADAM金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1型13(ADAMTS13)免疫試劑盒性T抗原-4抗體Rabbit Anti-Mink IgG/PE  PE標(biāo)記的兔抗水貂IgG

2,4-二氧乙 97%兔8-異構(gòu)前列腺素(8-epi-PGF2α)免疫試劑盒降鈣素受體抗體Rabbit Anti-Mink IgG/HRP  辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗水貂IgG

乙烯利 80%兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)免疫試劑盒1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框38抗體Rabbit Anti-Mink IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗水貂IgG