以下是紫外凝膠成像分析儀的一般操作流程:
準(zhǔn)備工作:
放置樣品:
選擇光源和設(shè)置參數(shù):
根據(jù)樣品類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)康模x擇合適的光源(如紫外光、可見光等)。例如,對(duì)于 EB 染色的核酸凝膠,通常選擇紫外光源;對(duì)于考馬斯亮藍(lán)染色的蛋白質(zhì)凝膠,可能選擇可見光光源。
設(shè)置相關(guān)參數(shù),如波長(zhǎng)(不同的染料或標(biāo)記物可能需要特定波長(zhǎng)的光來激發(fā)熒光)、照度(光的強(qiáng)度)、曝光時(shí)間等。這些參數(shù)的設(shè)置需要根據(jù)樣品的特性、染色情況以及預(yù)期的成像效果進(jìn)行調(diào)整。一般來說,初次使用時(shí)可以先嘗試使用默認(rèn)參數(shù)或參考儀器說明書中的建議值進(jìn)行拍攝,然后根據(jù)拍攝結(jié)果再進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
對(duì)焦與成像:
關(guān)閉暗箱門(如果有),通過儀器的調(diào)節(jié)裝置(如旋鈕、按鈕或軟件界面上的控制選項(xiàng)),緩慢調(diào)節(jié)鏡頭的焦距,使樣品在成像界面上清晰顯示。可以通過觀察實(shí)時(shí)顯示的圖像來判斷對(duì)焦是否準(zhǔn)確,圖像清晰且樣品的細(xì)節(jié)能夠清楚分辨時(shí),說明對(duì)焦完成。
確認(rèn)對(duì)焦清晰后,啟動(dòng)成像程序或按下相應(yīng)的拍攝按鈕,儀器開始記錄凝膠樣品的圖像。成像過程中要保持儀器穩(wěn)定,避免震動(dòng)或移動(dòng),以免影響圖像質(zhì)量。
圖像查看與分析(可選):
成像完成后,在電腦上的成像軟件中打開所拍攝的圖像,進(jìn)行查看和初步分析。可以根據(jù)需要調(diào)整圖像的對(duì)比度、亮度、灰度等參數(shù),以便更清晰地觀察和分析樣品中的條帶或斑點(diǎn)。例如,通過測(cè)量條帶的強(qiáng)度、大小等參數(shù),來對(duì)核酸或蛋白質(zhì)的含量、分子量等進(jìn)行初步判斷。
如果軟件支持進(jìn)一步的分析功能,如分子量計(jì)算、密度掃描、定量分析等,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行相應(yīng)的操作和數(shù)據(jù)處理。
保存與導(dǎo)出數(shù)據(jù):
清理與關(guān)閉儀器:

不同型號(hào)和品牌的紫外凝膠成像分析儀在操作細(xì)節(jié)上可能會(huì)有所差異,因此在使用前務(wù)必仔細(xì)閱讀儀器的操作說明書,并在必要時(shí)參考廠家提供的培訓(xùn)資料或咨詢相關(guān)技術(shù)支持人員。此外,在操作過程中要注意安全,特別是在使用紫外光源時(shí),避免直接暴露在紫外線下,以免對(duì)眼睛和皮膚造成傷害。