【儀器心得】ABI 7500超微量實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀使用心得
ABI 7500超微量實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是一臺(tái)特異性靶基因檢測(cè)與定量分析一體化的儀器,檢測(cè)過(guò)程中可以動(dòng)態(tài)觀察儀器每一循環(huán)過(guò)程每一個(gè)反應(yīng)管中PCR擴(kuò)增產(chǎn)物不斷增加的視覺(jué)感受,檢測(cè)結(jié)果出的也是非常的快,檢測(cè)結(jié)束后馬上就能出來(lái)。
五色熒光檢測(cè),光源是鹵鎢燈。鹵鎢燈光源通過(guò)五色光源濾光片后會(huì)激發(fā)每一個(gè)檢測(cè)樣品,得到CCD成像。儀器的靈敏度和定量分析準(zhǔn)確性非常的高,紅色熒光檢測(cè)時(shí)尤為突出。定量檢測(cè)速度也是很快,一般不超過(guò)2小時(shí),快速模式更快,一般不超過(guò)40分鐘。可采用96孔反應(yīng)板或單管以及8聯(lián)管檢測(cè)都可以。反應(yīng)體積也是很小,可達(dá)到微量級(jí)的10~100微升。
可用于相對(duì)定量的基因分析,以建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線為基礎(chǔ)的病原體定量分析,PCR擴(kuò)增后核酸序列的SNP基因定性分析,以陽(yáng)性內(nèi)標(biāo)對(duì)照品數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)的陽(yáng)性、陰性結(jié)果判定等應(yīng)運(yùn)。
分析軟件具有擴(kuò)增反應(yīng)曲線實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè);自動(dòng)設(shè)定熒光基線,自動(dòng)計(jì)算熒光閾值;建立標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行靶基因定量分析;在儀器運(yùn)行的同時(shí)可以觀察解離曲線數(shù)據(jù);具有對(duì)光源使用時(shí)間數(shù)據(jù)的監(jiān)測(cè);具有系統(tǒng)自我診斷功能,可以對(duì)系統(tǒng)故障實(shí)時(shí)診斷,自動(dòng)對(duì)樣品陽(yáng)性或陰性進(jìn)行判斷等諸多優(yōu)良的使用功能。儀器體積小,非常適宜在實(shí)驗(yàn)室使用。
儀器溫度控制是檢測(cè)的一大重要指標(biāo),該P(yáng)CR儀溫度范圍是4℃~100℃,快速升降溫速率可以達(dá)到±3.5℃/s,準(zhǔn)確度可達(dá)±0.25℃,控溫范圍寬,升降溫快,溫度控制精準(zhǔn)。
使用很簡(jiǎn)單,在電腦上編好方法,點(diǎn)擊開(kāi)始檢測(cè),儀器就自動(dòng)進(jìn)行檢測(cè),不用人為干預(yù),實(shí)驗(yàn)員算好檢測(cè)時(shí)間,到點(diǎn)看結(jié)果就可以,結(jié)果也可以生成PDF檢測(cè)報(bào)告,也可以打印。
總體,該儀器具使用范圍廣,檢測(cè)靈敏度高,準(zhǔn)確性好,檢測(cè)高效、快速,軟件功能也很強(qiáng)大等優(yōu)點(diǎn),用著很滿意,使用感覺(jué)很好。