培養皿是細胞培養的基礎設備之一,廣泛應用于生物學、醫學、藥學等領域的細胞研究中。在使用培養皿前,了解它的使用方法和注意事項對于細胞培養的成功至關重要,小編今天就帶大家一起了解一下。
使用方法:
1.消毒:在使用培養皿前,行嚴格的消毒,以避免細菌、病毒等污染。常用的消毒劑有70%酒精和10%漂白水。使用前,將培養皿或器械浸泡在消毒液中,時間一般為15-30分鐘。消毒后,用無菌PBS或生理鹽水洗滌,然后放在無菌操作臺上晾。
2.加入培養基:將準備好的細胞培養基加入到培養皿內,一般使用不同的容積和比例,如60mm培養皿加入2mL培養基,100mm培養血加入5-10mL培養基。
3.加入細胞:取出凍存的細胞或從培養m中取出已存在的細胞,用吸管吸取細胞,向培養皿內加入。不同細胞的貼附性和生長速度不同,建議根據所用的細胞種類來確定加入的細胞數。
4.搖晃:將培養皿進行輕微搖晃或傾斜,以便細胞分布均勻。
5.孵育:將培養皿放入帶有5%。CO2的恒溫培養箱中,并設定適當的培養溫度。不同的細胞對應的培養溫度不一樣,一般情況下為37C。
培養皿注意事項:
1.無菌操作:在培養實驗中,需要保證所有的實驗操作都在無菌條件下進行避免細菌、真菌、病毒等污染。
2.培養基儲存:一般來說,培養基需冷藏保存,不要長時間放置室溫下或暴露在光線下。在使用前應先將培養基放置在恒溫培養箱中恢復到37°C,避免影響細胞生長。
3.細胞儲存:通常需要將細胞凍存以備不時之需,保存在液氮中。在使用時要短時間內迅速將細胞解凍,以提高細胞的存活率。
4.細胞密度:每種細胞根據貼附性不同,需要有適宜的密度。如果過多或過少會影響貼附和生長,需要經過一定的實驗確定適宜的細胞密度。
5.細胞凝集:細胞在培養皿內容易出現凝聚,影響細胞生長,需要加入適量的離析劑或進行機械搖勻。
6.氣氛調節:細胞生長需要合適的氧氣和二氧化碳濃度,需要調節培養箱中的氣氛狀況,以保證細胞的正常生長。
細胞培養是一項實驗技術,要做好每個步驟、細心、耐心、認真,從而獲得較好的實驗結果。培養皿作為細胞培養的主要設備之一,使用方法和注意事項不容忽視。遵循正規的實驗操作規程,合理設置實驗參數,對細胞生長有重大影響,同時,也是整個實驗工作中非常重要的一個環節。
培養皿屬于濟南實驗儀器的一種,在使用時一定要進行無菌處理,這樣才有可能避免培養基在培養一種菌種時不被其他菌種污染,希望上述內容對你有幫助,歡迎關注我們了解更多培養皿知識。
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