1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6，8.0)
組份濃度  1 M Tris-HCl
配制量  1L
配制方法  1.稱量121.1 g Tris置于l L燒杯中。
 2.加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?br>  3.按下表加入濃HCl量調(diào)節(jié)所需要的pH值。
pH值  濃HCl
7.4  約70 ml
7.6  約60 ml
8.0  約42ml
4.將溶液定容至1 L。
5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高l℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。

1.5 M Tris-HCl (pH8.8)  
  組份濃度  1.5 MTris-HCl
配制量  1 L
配制方法  1.稱量181.7 g Tris置于1 L燒杯中。
 2.加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?br>  3.用濃HCl調(diào)節(jié)pH值至8.8。
 4.將溶液定容至1 L。
 5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高l℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。

1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6，8.0)   
組份濃度  100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA
配制量  1 L
配制方法  1.量取下列溶液，置于l L燒杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4，7.6，8.0)  100 ml
500 mM EDTA(pH8.0)  20 ml
 2.向燒杯中加入約800 ml的去離子水，均勻混合。
 3.將溶液定容至1 L后，高溫高壓滅菌。
 4.室溫保存。

3 M醋酸鈉(pH5.2)  
組份濃度  3 M醋酸鈉
配制量  100 ml
配制方法  1.稱量40.8 g NaOAc?3H2O置于100~200 ml燒杯中，加入約40 ml的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?br>  2.加入冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至5.2。
 3.加去離子水將溶液定容至100 ml。
 4.高溫高壓滅菌后，室溫保存。

PBS Buffer  
組份濃度  137 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4
配制量  1 L
配制方法  1.稱量下列試劑，置于l L燒杯中。
NaCl  8 g
KCl    0.2 g
Na2HPO4  1.42 g
KH2PO4  0.27 g
 2.向燒杯中加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?br>  3.滴加濃HCl將pH值調(diào)節(jié)至7.4，然后加入去離子水將溶液定容至1 L。
 4.高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：上述PBS Buffer中無(wú)二價(jià)陽(yáng)離子，如需要，可在配方中補(bǔ)充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

10 M醋酸銨  
組份濃度  10 M醋酸銨
配制量  100 ml
配制方法  1.稱量77.1 g醋酸銨置于100~200 ml燒杯中，加入約30 ml的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?br>  2.加去離子水將溶液定容至100 ml。
 3.使用0.22 µm濾膜過(guò)濾除菌。
4.密封瓶，室溫保存。
注意：醋酸銨受熱易分解，所以不能高溫高壓滅菌。

Tris-HCl平衡  
配制方法  1.使用原料：大多數(shù)市售液化是清亮無(wú)色的，無(wú)需重蒸餾便可用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。但有些液化呈粉紅色或黃色，應(yīng)避免使用。同時(shí)也應(yīng)避免使用結(jié)晶，結(jié)晶必須，160℃對(duì)其進(jìn)行重蒸餾除去諸如醌等氧化產(chǎn)物，這些氧化產(chǎn)物可引起磷酸二酯鍵的斷裂或?qū)е翿NA和DNA的交聯(lián)等。因此，的質(zhì)量對(duì)DNA、RNA的提取極為重要，我們推薦使用高質(zhì)量的進(jìn)行分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
 2.操作注意：腐蝕性，并可引起嚴(yán)重灼傷，操作時(shí)應(yīng)戴手套及防護(hù)鏡等。所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行，與接觸過(guò)的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗，并用肥皂和水洗滌，忌用乙醇。
 3.平衡：因?yàn)樵谒嵝詐H條件下DNA分配于有機(jī)相，因此使用前必須對(duì)進(jìn)行平衡使其pH值達(dá)到7.8以上，平衡操作方法如下：
 ①液化應(yīng)貯存于-20℃，此時(shí)的呈結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫，然后在68℃水浴中使充分融解。
 ②加入羥基喹啉(8-Qulnollnol)至終濃度0.1%。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不抑制劑及金屬離子的弱螯合劑，同時(shí)因其呈黃色，有助于方便識(shí)別有機(jī)相。
 ③加入等體積的1 M Tris-HCl(pH8.0)，使用磁力攪拌器攪拌l5min，靜置使其充分分層后，除去上層水相。
 ④重復(fù)操作步驟③。
 ⑤加入等體積的0.1 M Tris-HCl(pH8.0)。使用磁力攪拌器攪拌l5min，靜置使其充分分層后，除去上層水相。
 ⑥重復(fù)操作步驟⑤，稍微殘留部分上層水相。
 ⑦使用pH試紙確認(rèn)有機(jī)相的pH值大于7.8。
 ⑧將置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。

/氯仿/異戊醇  
配制方法  l.說(shuō)明：從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用，氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離，而異戊醇則有助于消除抽提過(guò)程中出現(xiàn)的氣泡。  
 2.配制方法：將Tris-HCl平衡與等體積的氯仿/異戊醇(24:1)混合均勻后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。

10%(W/V)SDS  
組份濃度  10%(W/V)SDS
配制量  100 ml
配制方法  1.稱量10 g高純度的SDS置于100~200 ml燒杯中，加入約80 ml的去離子水，68℃加熱溶解。
 2.滴加濃HCl調(diào)節(jié)pH值至7.2。
 3.將溶液定容至100 ml后，室溫保存。

2 N NaOH  
組份濃度  2 N NaOH
配制量  100 ml
配制方法  1.量取80 ml去離子水置于100~200 ml塑料燒杯中(NaOH溶解過(guò)程中大量放熱，有可能使玻璃燒杯炸裂)。
 2.稱取8 g NaOH小心地逐漸加入到燒杯中，邊加邊攪拌。
 3.待NaOH溶解后，用去離子水將溶液定容至100 ml。
 4.將溶液轉(zhuǎn)移至塑料容器中后，室溫保存。

2.5 N HCl  
組份濃度  2.5 N HCl
配制量  100 ml
配制方法  1.在78.4 ml的去離子水中加入21.6 ml的濃HCl(11.6 N)，均勻混合。
 2.室溫保存。

5 M NaCl  
組份濃度  5 M NaCl
配制量  1 L
配制方法  1.稱量292.2 g NaCl置于1 L燒杯中，加入約800 ml的去離子水后攪拌溶解。
 2加去離子水將溶液定容至1 L后，適量分成小份。  
 3.高溫高壓滅菌后，4℃保存。

20%(W/V)Glucose(葡萄糖)
組份濃度  20%(W/V)Glucose
配制量  100 ml
配制方法  1.稱取20 g Glucose置于100~200 ml燒杯中，加入約80 ml的去離子水后。攪拌溶解。
 2.加去離子水將溶液定容至l 00 ml。
 3.高溫高壓滅菌后，4℃保存。

Solution l (質(zhì)粒提取用)
  組份濃度  25 mM Tris-HCl(pH8.0)，10 mM EDTA，50 mM Glucose
配制量  1 L
配制方法  1.量取下列溶液，置于l L燒杯中。
1 M Tris-HCl(pH8.0)  25 m
0.5 M EDTA(pH8.0)  20 m
20% Glucose(1.11 M)  45 m
dH2O  910 m
 2.高溫高壓滅菌后，4℃保存。
 3.使用前每50 ml的Solution l中加入2 ml的RNase A(20 mg/ml)。

Solution Ⅱ(質(zhì)粒提取用)
組份濃度  200 mM NaOH，1%(W/V)SDS
配制量  500 ml
配制方法  1.量取下列溶液，置于500 ml燒杯中。
10%SDS  50 ml
2NNa0H  50 ml
 2.加滅菌水定容至500 ml，充分混勻。
 3.室溫保存。此溶液保存時(shí)間不要超過(guò)一個(gè)月。
注意：SDS易產(chǎn)生氣泡，不要?jiǎng)×覕嚢琛?br>
Sol ution Ⅲ(質(zhì)粒提取用)
組份濃度  3 M KOAc，5 M Ethanoic acid (乙酸)
配制量  500 ml
配制方法  1.稱量下列試劑，置于500 ml燒杯中。
KOAc  147g
Ethanoic acid  57.5ml
 2.加入300 ml去離子水后攪拌溶解。
 3.加去離子水將溶液定容至500 ml。
 4.高溫高壓滅菌后，4℃保存。

0.5 M EDTA (pH8.0)  
組份濃度  0.5 M EDTA
配制量  1 L
配制方法  1.稱取186.1 g Na2EDTA?2H2O，置于1 L燒杯中。
 2.加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢琛?br>  3.用NaOH調(diào)節(jié)pH值至8.0(約20gNaOH)。
   注意：pH值至8.0時(shí)，EDTA才能溶解。
 4加去離子水將溶液定容至1 L。
 5.適量分成小份后，高溫高壓滅菌。
 6.室溫保存。

1 M DTT  
組份濃度  1 M DTT
配制量  20 ml
配制方法  1.稱取3.09 g DTT，加入到50 ml料離心管內(nèi)。
 2.加20 ml的0.01 M NaOAc(pH5.2)，溶解后使用0 22 µm濾膜過(guò)濾除菌。
 3.適量分成小份后，-20℃保存。

10 mM ATP  
組份濃度  10 mM ATP
配制量  20 mL
配制方法  1.稱取121 mg Na2ATP?3H2O，加入到50 ml塑料離心管內(nèi)。
 2. 加20 ml的25 mM Tris-HCl(pH8.0)，攪拌溶解。
 3.適量分成小份后，-20℃保存。