[檢測方法] ELISA法
[方法學原理] 用精制的基因工程表達的梅毒螺旋體特異性抗原包被固相載體，加患者血清后，如患者血清中有相應抗體，可形成抗原抗體復合物。在此基礎上加入酶標記抗原，即可形成抗原—抗體—酶標記復合物。再加入酶底物，底物經酶分解后顯色，即為陽性反應。反之，若患者血清中無相應抗體，則酶標記抗原就不能與包被抗原相結合，從而加入酶底物不會顯色，此為陰性反應。
[標本準備] 靜脈血2ml，不抗凝。
[試劑]
1．TP酶標板
2．TP陽性對照
3．TP陰性對照
4．TP酶標試劑
5．顯色劑A
6．顯色劑B
7．終止液
8．濃縮洗滌液
[儀器] 酶標儀或全自動酶聯免疫檢測儀。
[檢測步驟]
1．配制洗滌液 將50ml濃縮洗滌液（20X）用蒸餾水或去離子水稀釋至1 000ml備用。
2．根據標本數量，將酶標板條固定于板架上，每板設陰性對照2孔，陽性對照2孔，空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步相同）。
3．加酶 每孔加100gl酶標試劑。
4．加樣 分別在相應孔中加入待檢樣品，陰性對照、陽性對照20u1，振蕩混勻。
5．溫育 用封板膜封板后，置37℃環境中溫育60min。
6．洗滌 小心將封板膜揭掉，用洗滌液充分洗滌6遍，后一次盡量拍干。
7．顯色 每孔加顯色劑A、B各50ul，輕輕混勻，用封板膜封板后置37℃環境中避光顯色15min。
8．測定 每孔加終止液50gl，混勻，以空白調零點，用酶標儀450nm波長測定各孔OD值。
[結果判定]
1．臨界值（cutoff）計算cutoff＝陰性對照孔OD均值+0．18。
2．陽性判定 樣品OD值≥cut off值為梅毒螺旋體抗體陽性。
3．陰性判定 樣品OD值
[正常參考值] TPAb陰性
[注意事項）
1．檢測必須符合實驗室管理規范和生物安全守則的規定。操作時必須戴手套、穿工作服，嚴格執行消毒隔離制度。所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
2．梅毒螺旋體抗體檢測結果的判定必須以酶標儀讀數為準，在正常情況下，本試驗陰性對照孔OD值應≤0．10，陽性對照孔OD值應≥0．80。若陰性對照>0．10，應查明原因，必要時應重新操作。
3．試劑盒從冷藏環境中取出時應置室溫環境中平衡15～30min后再用，未用完的微孔條用自封袋密封保存。
4．洗滌液可用蒸餾水或去離子水配制。洗滌時各孔均需加滿洗滌液，防止孔內有游離酶不能洗凈，使用洗板機洗滌時應設置30～60s的浸泡時間。
5．不同批次試劑不能混用，封板膜為一次性用品，不能重復使用。
[臨床意義] 以梅毒螺旋體為抗原檢測血清中特異性抗體，敏感性高，特異性強，是目前較好的檢測方法。陽性見于梅毒螺旋體感染，但此類抗體除IgM外，即使經過足量抗梅毒治療，仍能在患者體內持續存在甚至保留終身，因此不適于觀察療效、復發及再感染。但經治療后，IgM比抗心磷脂抗體消失快。因此，TP-IgM的存在是活動性梅毒的一個重要指征。
1期梅毒（硬性下疳，感染后l至數周）陽性率FTA—ABS為81％～87％，TPA為50％～60％，RPR為68％～76％，早期診斷TPA敏感性較低。2期梅毒（感染后8—10周左右），FTA-ABS、TPA和RPR陽性率均可達99％～100％。晚期及隱性梅毒FTA—ABS和TPA陽性率95％～100％，RPR下降至66％～68％。
除梅毒螺旋體感染外，一些非梅毒螺旋體感染如品他、雅司等熱帶性密螺旋體感染癥，口腔、齒槽及眼結膜等密螺旋體感染癥亦可呈假陽性；SLE血清存在的抗核抗體，FTA-ABS可呈假陽性反應。
以RPR為代表的梅毒血清學非特異性反應和以TP-Ab為代表的梅毒血清學特異性反應在臨床應用上各有其優缺點，二者可聯合使用。其結果解釋見表。
梅毒血清學檢查的比較
梅毒血清學試驗方法較多，無論哪一種方法其敏感性和特異性都達不到100％。因此，對可疑病例應采用2～3種方法聯合使用，以提高診斷的正確率。
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