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海馬體與大腦的記憶功能和導(dǎo)航功能相關(guān),嚙齒動物的海馬體常被用來作為研究神經(jīng)生理學(xué)的模型系統(tǒng)例如研究神經(jīng)可塑性等。該部位的血管變化與腦部疾病密切相關(guān),例如阿爾茨海默氏病,癡呆和癲癇病。小鼠海馬體周圍的血管成像可能有助于進(jìn)一步闡明這些疾病的潛在機(jī)制。光學(xué)相干斷層掃描血管造影(OCTA)是一種新興技術(shù),可以提供無標(biāo)簽的血流信息。由于海馬體是小鼠大腦的深層結(jié)構(gòu),因此直接使用OCTA和其他顯微成像方式對血管網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行可視化一直是醫(yī)學(xué)影像學(xué)的研究挑戰(zhàn)之一。目前已有使用多光子顯微鏡對海馬血管進(jìn)行了成像,但是使用此技術(shù)時,必須用熒光探針標(biāo)記。而在此研究中研究者Kwan Seob Park等人使用1.7μm掃描OCT系統(tǒng)對小鼠海馬體結(jié)構(gòu)進(jìn)行了無標(biāo)簽和noninvasive微血管成像。成像結(jié)果表明,具有一定穿透能力的OCTA系統(tǒng)可以可視化海馬不同部位與大腦深部區(qū)域相對應(yīng)的血流。
在該實驗中,研究者使用OCTA系統(tǒng)對5周齡小鼠的大腦成像,通過顱窗觀察海馬體中的微血管系統(tǒng)。為了確認(rèn)獲得的OCT腦部圖像的組織學(xué)位置,我們將OCT結(jié)構(gòu)圖像和OCTA圖像與H&E組織學(xué)進(jìn)行了比較如圖一。并對海馬體結(jié)構(gòu)中的不同部分進(jìn)行了血管成像如圖二,通過對不同深度的成像分別呈現(xiàn)了CCg,CA1g,DGg三部分的微血管信息。
圖一:從左側(cè)開始,H&E組織學(xué)顯示了海馬結(jié)構(gòu),相應(yīng)的OCT圖像和OCTA圖像。
圖二:小鼠腦海馬結(jié)構(gòu)中的結(jié)構(gòu)和微脈管系統(tǒng)的體內(nèi)成像。為了確認(rèn)1.7μmOCTA與深部腦成像的性能,我們比較了1.7μm和1.3μmOCTA成像。結(jié)果顯示在伴隨深度增加的同時1.3μmOCTA具有更好的亮度,但是1.7μmOCTA具有更好的對比度,如圖三。
圖三:1.7 µm和1.3 µm OCTA的圖像質(zhì)量比較。實驗中使用的鏡頭空氣中成像深度為1.8毫米,可以覆蓋整個海馬體的結(jié)構(gòu)(空氣中約為1.4毫米)。但是,使用單個成像無法獲得整個海馬結(jié)構(gòu)的OCTA圖像。由于小鼠腦組織的濁度,有效DOF略有降低,而海馬體附近的血管只有幾微米大小。因此,當(dāng)成像平面與焦點平面不對齊時,導(dǎo)致深層的微血管很容易模糊或不可見。在沿軸向更改焦點位置以對此進(jìn)行校正時,獲得了四個不同的數(shù)據(jù)。每個焦點位置由不同的彩色箭頭指示如圖四。將各個層圖像進(jìn)行動畫擬合得到完整的海馬體內(nèi)部微血管圖像如文開頭視頻。
圖四:合并后的OCTA總計具有4種不同的焦深和分段的小鼠大腦深部血管的分布圖。
總而言之,此文描述了使用1.7-μmSS-OCT血管造影systerm對小鼠大腦海馬血管網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行體內(nèi)無標(biāo)記觀察。生成圖像顯示該系統(tǒng)可以成像到海馬結(jié)構(gòu)的底部。因此可以體內(nèi)實現(xiàn)noninvasive,無標(biāo)簽深層血管成像。此外,我們發(fā)現(xiàn),與1.3μm波長的光相比,較低的1.7μm的光更加適合用于深部OCTA成像,因為圖像的背景水平較低。綜上所述,此研究已經(jīng)證明1.7-μmSS-OCT血管造影可以提供具有高時空分辨率的海馬結(jié)構(gòu)及血管深度圖像。深部腦血管成像有助于理解多種病理,例如阿爾茨海默氏病,癡呆和癲癇。此技術(shù)將為腦部的相關(guān)研究提供全新的視角。
參考文獻(xiàn)
Park KS, Shin JG, Qureshi MM, Chung E, Eom TJ. Deep brain optical coherence tomography angiography in mice: in vivo, noninvasive imaging of hippocampal formation. Sci Rep. 2018;8(1):11614. Published 2018 Aug 2. doi:10.1038/s41598-018-29975-6
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