茶葉中茶氨酸的高效液相色譜檢測方案 茶氨酸（L-Theanine）是茶葉中*的游離氨基酸，茶氨酸是γ-乙基酰胺，有甜味。茶氨酸含量因茶的品種、部位而變動。茶氨酸在干茶中占重量的1%-2%。茶氨酸在化學構造上與腦內活性物質谷酰胺、相似，是茶葉中生津潤甜的主要成份。茶氨酸含量約為的1～2%左右，其含量隨發酵過程減少。【茶氨酸的作用】對中樞神經影響：茶氨酸可以明顯促進腦中樞多巴胺(dopamine)釋放 ，飲茶抗疲勞作用被認為在一定程度上來自這一效果降壓作用：茶氨酸對腦內中樞神經遞質5-羥色胺分泌量具有調節作用影響記憶：茶氨酸可以增強記憶能力，提高學習效率健康食品：保健食品市場上多數是為成人防病或改善作用的品種。像茶氨酸這種既不具有催眠，又可以解消疲勞、降低血壓和提高學習記憶能力的保健食品實為少見，引人注目。為此，茶氨酸曾在1998年德國召開的國際食品原料會上獲得研究部門大獎。 鑒于茶氨酸在市場上的應用日趨增長，我公司參照GB23193-2008，利用LC-10Tvp高效液相色譜儀給出了茶氨酸的HPLC檢測方案。 1、儀器與試劑 1.1儀器、設備 LC-10Tvp高效液相色譜儀 Vertex 色譜柱：250mm×4.6mm×5μm 分析天平 振搖恒溫水浴 離心機 C18固相萃柱 針頭過濾器 微孔濾膜：0.45µm 1.2試劑 茶氨酸標準品 鄰苯二甲醛（OPA) 乙硫醇 硼酸 氫氧化鈉 甲醇（色譜純） 乙腈（色譜純） 2、供試品溶液和對照品溶液的制備 對照品溶液的制備 取茶氨酸儲備液（1mg/ml)適量，用水稀釋成所需濃度。 供試品溶液的制備 1、樣品前處理：茶葉樣品經磨碎混勻后，準確稱取0.5g（精確到0.001g），加水100ml，在80℃振搖恒溫水浴中浸提45min，冷卻后將浸提液離心，過濾，上清液混勻待用。 2、凈化：C18小柱活化：依次用5ml甲醇，5ml水加入到凈化小柱中，將上述試液過固相萃取柱，在經過0.46um濾膜過濾到棕色試管中，待衍生用。 3、衍生：準確吸取茶氨酸標準使用液（或樣品液）0.5ml于棕色試管中，加入0.5mlOPA衍生試劑，反應2min后，立即取10ml上機分析。3、色譜條件色譜柱：C18, 4. 6 mmx250 mm，粒度5 µm流動相：以20mmol/l乙酸銨溶液為流動相A，以20mmol/l乙酸銨溶液：甲醇：乙腈=1：2：2為流動相B，VA:VB=1：1波長：338nm流速：1. 0 mL/min柱溫：40℃4、測定法 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得。