氣相色譜儀俗稱GC色譜儀,它是以氣體為活動相(載氣)。當某一種被剖析的多組份混合樣品注入汽化室且瞬間汽化后,樣品由載氣帶著,經過裝有固定相的色譜柱時,因為組份分子與色譜柱內部固定相分子間要發作吸附、脫附溶解等進程,在載氣的沖洗下,各組份在兩相間作重復屢次分配(即保存時刻和作用力不同)并在柱中得到別離,隨后次序經過柱后檢測器順次被檢測出來,并轉換為電信號送至色譜數據處理體系繪出色譜圖給出定量、定性剖析成果。
氣相色譜儀重要的組成部分色譜柱的運用跟著運用時刻的延伸會逐步損耗,直至“退休”,詳細色譜柱的“退休”規范,沒有一個一致的規范規則,從經歷來看,是否能夠直接參閱色譜柱的塔板數降低到新柱子時的百分之多少時,就能夠以為該色譜柱不能再運用了呢?將塔板數作為點評色譜柱質量的僅有目標適宜嗎?在您的實驗室里是怎么判別一根色譜柱不能夠再用了呢?
塔板數是一個粗略的目標,不能作為點評色譜柱的規范。一般運用塔板數來調查氣相色譜儀體系:將新柱子接到儀器上,依據色譜柱生產商供給的測驗條件測驗該色譜柱,你應該得到和剖析陳述上相同的成果。zui差也應該得到比陳述值低10%的塔板數。假如你所測得的塔板數遠遠低于廠家供給的陳述數據,這就說明你的色譜體系可能存在一些問題。進樣器、柱外效應、毛細銜接以及檢測器都是簡單出現問題的地方。
信任每個氣相色譜儀工作者都會關心分辨率,分辨率是調查一根色譜柱別離詳細樣品的好壞程度的目標。色譜的核心使命就是為了使每個峰完成別離,咱們在實踐工作中需求得到合理峰寬的窄峰以便取得較低的檢測限(這現已不是什么難題,現在的色譜柱都能夠達到這個要求)。
但是,咱們需求考慮的氣相色譜儀另一個要素是塔板數對分辨率的影響只是是平方根的聯系,這意味著當一根色譜柱的塔板數下降50%,分辨率只是下降7%。而當一根色譜柱塔板數下降為新柱子一半的時分,你必定看到了其它愈加嚴峻的癥狀告訴你這根色譜柱的壽命不長了。其實,大多數用戶只是運用色譜柱塔板數的一小部分。
經很多實驗標明塔板數并不能直接判別色譜柱的“退休年齡”較好的辦法是運用壓力、分辨率和峰形的混合目標來調查一根色譜柱的狀態。壓力的丈量是zui簡單的,一般咱們斷定的氣相色譜儀辦法要滿意以下的要求:用氣相色譜儀新柱子時柱壓不高于2500psi,在任何狀況下壓力都不超越3000psi。雖然現代的液相色譜體系都可在更高的壓力下運用,但因為高壓發生的體系損耗和泄漏的問題會很嚴峻。當壓力超越3000psi時,考慮替換進樣器和色譜柱之間的0.5mm孔徑的在線濾片。假如替換濾片后壓力依然高,則色譜柱的濾片或者是色譜柱現已被污染,這提示咱們該換柱子了。有統計標明,超越60%的色譜柱損壞是因為壓力過高的原因。
分辨率是咱們調查色譜柱的一個十分重要的目標,只要兩個組分能夠取得基線別離,對該剖析物的定量就不會有什么問題。關于對稱的高斯峰來講,1.5的分辨率即可得到基線別離;若Rs在1.7至2.0之間則更好。若峰拖尾嚴峻則需求更高的分辨率。運用分辨率作為色譜柱的點評目標的優點在于咱們能夠直觀地看到相鄰的峰的別離狀況。
別的一個調查色譜柱質量的規范是峰形拖尾狀況,出廠測驗陳述的峰形都十分美麗,但這并不代表該色譜柱剖析實踐樣品的狀況。實踐樣品中總是含有或多或少引起峰形拖尾的組分。zui值得一提的是含有氮原子的化合物,這些化合物和硅膠骨架上的游離硅羥基結合十分嚴密,跟著色譜柱運用時刻越長,鍵合相流失,拖尾則愈加嚴峻。但是拖尾狀況的改動不像分辨率的改動那樣能夠立刻看出來。基于此,定一個拖尾因子的上限,如美國藥典規則拖尾因子不超越1.8。
斷定色譜柱“拋棄”規范的時刻是當咱們開發剖析辦法或作辦法認證的時分。一般,在開發剖析辦法的進程中你會實驗幾根色譜柱,剖析足夠多的實踐樣品,你知道當別離變差的時分是什么樣的狀況。我傾向于在開始時運用一個寬的規模。咱們的經歷是這樣的:你假如在開始時緊縮體系適用性要求,在辦法認證后再放寬這個要求是很困難的。在剖析實踐樣品之前進行體系適用性調查,以確保該色譜辦法滿意剖析者能夠承受的規范。