血鉛檢測的幾種方法

發布時間03年04月23日 10時27分

　　
    一般認為有四種。紅細胞原卟啉（EP）的測試法、原子吸收光譜法（AAS）、塞曼效應石墨爐原子吸收光譜法（GFAAS）、陽極溶出伏安法（ASV）。

什么是紅細胞原卟啉（EP）測試法？

    紅細胞原卟啉（EP）升高可以間接反映出人體血鉛的含量。在正常情況下原卟啉（EP）和鐵在鐵絡和酶的作用下在紅細胞內結合生成血紅素。在鉛負荷增高的情況下鐵絡和酶受到抑制，原卟啉（EP）在紅細胞內堆積。在紅細胞中，90%的原卟啉（EP）會以鋅原卟啉（ZPP）形式存在（ZPP）在光照射下會發射429nm的熒光，用血液熒光測定法即可測得ZPP的含量。

    因為EP對光敏感，因此在標本送檢過程中應注意避光，應盡快進行測定。同時EP增高除了見于鉛中毒外，還見于缺鐵性貧血、感染和先天性卟啉代謝異常性疾病（血友病等）在測試首先一定要先排除這些造成EP增高的可能。

    依據是大量的研究結果表明：在鉛濃度為10ug/dl~25ug/dl時，用EP法檢測，其診斷的靈敏度和精度都是非常低的。而這一血鉛水平已明確對兒童健康有害。所以用EP法檢測會造成兒童實際血鉛水平較高而測量結果較低，即假陰性現象出現。在美國，1991年發表的《預防幼兒鉛中毒》中，CDC已明確表示不能再用EP測試法來進行兒童鉛含量的普查。

什么是原子吸收光譜法（AAS）？

    原子吸收光譜法是一種常規的元素分析法 ，可以用來分析常規樣品中鉛含量。它是基于鉛所產生的原子蒸汽對特征譜線的吸收作用來進行定量分析。首先將試液噴射成霧狀進入燃燒火焰中，含鉛鹽的霧滴在火焰溫度下揮發并離解成鉛原子蒸汽，在用鉛空心陰極燈作光源，它輻射出283.3nm的鉛特征譜線的光，當通過一定厚度的鉛原子蒸汽時，部分光被蒸汽中基態的原子吸收而減弱。通過單色器和檢測器測得鉛特征譜線被減弱的程度，即可求得試樣中鉛的含量。

    對于用火焰原子吸收法做人體血鉛含量分析，無論是用甲基異丁酮萃取血鉛抑或是用螯合劑，它是一種舊的技術，由于對人體產生影響的血鉛是微量的，再加上鉛是易揮發且電離電位較低的元素。使用火焰原子吸收光譜，鉛的原子化率是非常低的，即它的靈敏度是達不到檢測人體血鉛的檢測范圍。并且此方法所需的靜脈血量較多（5~7毫升）。同時由于在處理血樣的過程中是*暴露在環境（如灰塵）中和血樣進行硝化處理過程中使用國產硝酸本身的鉛含量過高，因此可能造成對血樣的二次污染，會造成兒童實際血鉛水平較低而測量結果較高，即假陰性現象出現。

什么是塞曼效應石墨爐原子吸收光譜法（GFAAS）？

    石墨爐原子吸收光譜測定法已被有效的用來測定血液中鉛含量。現代的原子爐測定儀器是可靠、準確、高精度和全自動的。現有的幾家生產商在市場上銷售的原子石墨爐儀器都有測定血鉛含量的功能（可被設置）。這類儀器要有塞曼效應背景修正系統，并保證用于分析鉛的波長穩定在283.3nm。 由于對人體產生影響的血鉛是微量的，再加上鉛是易揮發且電離電位較低的元素，如果使用一般火焰的原子光譜，鉛的原子化率是非常低的，即它的靈敏度是達不到檢測人體血鉛的檢測范圍而使用石墨爐原子吸收光譜可以大大提高鉛的原子化效率，使靈敏度大幅度增加而達到檢測血鉛的檢測范圍。但石墨爐原子吸收光譜受光散射和分子吸收的影響比火焰原子吸收量大，因此有必要對石墨爐原子吸收光譜進行背景校正，一般選擇塞曼效應校正背景。所以塞曼效應校正背景是通過旋轉的檢偏器把空心陰極燈的光分成平行于磁場的偏振光PII和垂直于磁場的偏振光PI，在石墨爐加上11K高斯的*磁場。這時吸收線便分裂為π、δ+、δ-三個成分。檢偏器和調制器一起旋轉，使PII和PI以一定頻率交替的通過原子化器。由于吸收線的π成分只吸收PII不吸收PI，故可利用PII測出原子吸收和背景吸收，PI不被π、δ+、δ-吸收，可以利用PI來測定背景吸收，兩組吸收訊號經電子系統處理（減法），既得到真實的原子吸收訊號，達到校正背景的目的。

    同時，在使用塞曼效應石墨爐原子吸收光譜來測定血鉛時，要注意以下幾個方面的問題：

    1、在采血后對血樣進行硝化處理過程中，由于此過程血樣是*暴露在環境（如灰塵）中，因此一定注意環境中的鉛污染血樣。

    2、在采血后對血樣進行硝化，硝化的作用是去除血液里的纖維素，使鉛以游離態的形式存在于溶液中，處理過程中有時使用國產硝酸本身的鉛含量就很高，甚至會高于血樣的鉛含量，因此有必要在使用硝酸對血樣進行硝化處理前先檢測硝酸的鉛含量并采取措施降低硝酸的鉛的含量，避免血樣的二次污染。

    3 、在使用塞曼效應石墨爐原子吸收光譜來測定血鉛時必須要有專業技術人員來完成此操作過程。

什么是陽極溶出伏？ 安法 （ASV）

    陽極溶出伏安法 （ASV）是測量各種間質中多種金屬的一種電化學分析方法，它被用來測定血鉛的濃度已有25年多的歷史。雖然此技術比較直接，而且儀器也不貴，但此技術方法在分析時所要求使用的每個試劑的價格卻比石墨爐原子吸收法所用試劑價格要高，用陽極溶出伏安法的儀器體積很小，比石墨爐原子吸收法所用設備占用的空間也小，并且也不要求別的特殊輔助設備。這種分析方法的原理是要求鉛必須從其復合物中分離出來，并且以游離態Pb2+離子存在，在鍍汞的石墨電極上加負的電勢使游離Pb2+被電鍍在鍍汞的石墨碳電極表層。再在一個特定的電壓值上，鉛離子又會從電極上溶出，在此過程中將產生一定的電流，而此電流值正好與血樣中鉛濃度的大小成比例。