紫外可見分光光度計蛋白檢測優(yōu)缺點分析
優(yōu)點:對于各種蛋白質呈色基本相同,特異性和準確度好,精密度好,呈色穩(wěn)定性好,試劑單一,方法便捷、快速不消耗樣品,測定后仍能回收利用。
缺點:準確度較差,干擾物質多,在用標準曲線法測定蛋白質含量時,對那些與標準蛋白質氨基酸含量差異大的蛋白質,有一定的誤差。故該法適用于測定與標準蛋白質氨基酸組成相似的蛋白質。若樣品中含有嘧啶及核酸等吸收紫外光的物質會出現較大的干擾。核酸的干擾可以通過查校正表,再進行計算的方法,加以適當的校正。但是因為不同的蛋白質和核酸的紫外吸收是不相同的,雖然經過校正,測定的結果還是存在一定的誤差,此外,進行紫外
吸收法測定時,由于蛋白質吸收高峰常因PH的改變而有變化,因此要注意溶液的PH值,測定樣品時的PH要與測定標準曲線的PH相一致。
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