生物顯微鏡的分類

1. 按照定位級(jí)別分類?？梢苑譃閷W(xué)生級(jí)、實(shí)驗(yàn)級(jí)、研究級(jí)生物顯微鏡。

2. 按照目鏡的個(gè)數(shù)分類。可以分為單目型、雙目型、三目型生物顯微鏡。

按照目鏡個(gè)數(shù)分類

3. 按目鏡和移動(dòng)臺(tái)的相對(duì)位置分類。可以分為正置生物顯微鏡和倒置生物顯微鏡。正置(常規(guī))生物顯微鏡的物鏡在移動(dòng)臺(tái)的上方，倒置生物顯微鏡的物鏡在移動(dòng)臺(tái)的下方。

按照目鏡和移動(dòng)臺(tái)相對(duì)位置分類

4. 按成像原理分類。可以分為光學(xué)生物顯微鏡和電子生物顯微鏡。

光學(xué)顯微鏡主要由目鏡、物鏡、載物臺(tái)和反光鏡(集光鏡)組成。目鏡和物鏡都是凸透鏡，焦距不同。物鏡的凸透鏡焦距小于目鏡的凸透鏡的焦距。物鏡相當(dāng)于投影儀的鏡頭，物體通過(guò)物鏡成倒立、放大的實(shí)像。目鏡相當(dāng)于普通的放大鏡，該實(shí)像又通過(guò)目鏡成正立、放大的虛像。經(jīng)顯微鏡到人眼的物體都成倒立放大的虛像。

顯微鏡的成像原理

電子顯微鏡是根據(jù)電子光學(xué)原理，用電子束和電子透鏡代替光束和光學(xué)透鏡，使物質(zhì)的細(xì)微結(jié)構(gòu)在非常高的放大倍數(shù)下成像。由于電子束的波長(zhǎng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于可見(jiàn)光的波長(zhǎng)，所以即使電子束的錐角僅為光學(xué)顯微鏡的1%，電子顯微鏡的分辨本領(lǐng)仍遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于光學(xué)顯微鏡。光學(xué)顯微鏡的大放大倍率約為2000倍，而現(xiàn)代電子顯微鏡大放大倍率已經(jīng)超過(guò)了300萬(wàn)倍 ^[1] 。

電子顯微鏡

生物顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)

生物纖維鏡的結(jié)構(gòu)

1. 鏡座。位于顯微鏡底部，用于支持全鏡。

2. 鏡臂。位于鏡筒后面，通常為弓形，用于支持鏡筒和搬移顯微鏡時(shí)握持部位。

3. 鏡筒。位于顯微鏡上方，上接目鏡，下接物鏡轉(zhuǎn)換器。

4. 物鏡轉(zhuǎn)換器。位于鏡筒下方的轉(zhuǎn)盤(pán)，通常有3~4個(gè)圓孔，可裝配不同放大率的物鏡，可使每個(gè)物鏡通過(guò)鏡筒與目鏡構(gòu)成一個(gè)放大系統(tǒng)。

5. 移動(dòng)臺(tái)。又名載物臺(tái)、工作臺(tái)或鏡臺(tái)，用于放置標(biāo)本。移動(dòng)臺(tái)上有兩個(gè)金屬壓片夾叫標(biāo)本夾，用于固定玻片標(biāo)本。有的載物臺(tái)上裝有推片器用來(lái)移動(dòng)標(biāo)本，有的載物臺(tái)本身可以移動(dòng)。

6. 調(diào)焦裝置。為了得到清晰的圖像，必須調(diào)節(jié)物鏡與標(biāo)本之間的距離，使物鏡的焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)標(biāo)本，這一操作叫調(diào)焦。調(diào)焦通過(guò)粗準(zhǔn)焦旋鈕和細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕來(lái)實(shí)現(xiàn)。

7. 物鏡。安裝在鏡筒下端的物鏡轉(zhuǎn)換器下方，因?yàn)樗拷灰曃矬w，故又稱接物鏡。物鏡是決定顯微鏡性能如分辨力的重要的構(gòu)件。物鏡的作用是將標(biāo)本the first次放大成倒像。一臺(tái)顯微鏡備有數(shù)個(gè)物鏡，每個(gè)物鏡由數(shù)片不同球面半徑的透鏡組成。物鏡下端的透鏡口徑越小，鏡筒越長(zhǎng)，其放大倍數(shù)越高；否則反之。物鏡有低倍物鏡和高倍物鏡，其放大倍數(shù)一般刻在物鏡的鏡筒上，例如4×、8×、10×、……、100×，分別表示4倍、8倍、10倍……、100倍。其中40-65倍叫高倍物鏡，90或100倍的稱為油浸物鏡。

8. 目鏡。安裝在鏡筒上端，因?yàn)樗拷^察者的眼睛，又稱接目鏡。目鏡的作用是將由物鏡放大的實(shí)像進(jìn)一步放大成一個(gè)起立的虛像，其作用相當(dāng)于一個(gè)放大鏡。但它并不增加顯微鏡的分辨力。目鏡的視野內(nèi)有一條黑線，叫做“指針”，可以指示所觀察的部位。根據(jù)需要，目鏡內(nèi)也可安裝測(cè)微尺，用以測(cè)量所觀察物體的大小。一般顯微鏡備有幾個(gè)放大倍數(shù)不同的目鏡，其放大倍數(shù)刻在目鏡邊框上，如5×、10×、15×等（顯微鏡的總放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)）。

9. 聚光鏡。安裝在移動(dòng)臺(tái)下方支架上，主要由聚光鏡和孔徑光闌組成。聚光鏡作用是會(huì)聚集光鏡的光線，增加標(biāo)本的照明?？讖焦怅@又稱光圈用來(lái)調(diào)節(jié)光線的強(qiáng)弱。在孔徑光闌下面，通常還有一個(gè)圓形的濾光片架，可根據(jù)鏡檢需要放置濾光片。

10. 光源。通常安裝在顯微鏡的鏡座內(nèi)提供光源。

生物顯微鏡的使用方法

1. 取用和放置。從鏡箱中取出顯微鏡時(shí)，必須一手握持鏡臂，一手托住鏡座，保持鏡身直立，切不可用一只手傾斜提攜，防止摔落目鏡。要輕取輕放，放時(shí)使鏡臂朝向自己，距桌子邊沿5-10厘米處。要求桌子平衡，桌面清潔，避免直射陽(yáng)光。

2. 開(kāi)啟光源。打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)。

3. 放置玻片標(biāo)本。將待鏡檢的玻片標(biāo)本放置在移動(dòng)臺(tái)上，使其中材料正對(duì)聚光鏡*。然后用彈簧壓片夾在玻片的兩端，防止玻片標(biāo)本移動(dòng)。再通過(guò)調(diào)節(jié)玻片移動(dòng)器或調(diào)節(jié)移動(dòng)臺(tái)，將材料移至正對(duì)聚光鏡*的位置。

4. 低倍物鏡觀察。用顯微鏡觀察標(biāo)本時(shí)，應(yīng)先用低倍物鏡找到物像。因?yàn)榈捅段镧R觀察范圍大，容易找到物像并定位到需作精細(xì)觀察的部位。方法為：

1) 轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦旋鈕，用眼從側(cè)面觀望，使鏡筒下降，直到低倍物鏡距標(biāo)本0.5厘米左右。

2) 從目鏡中觀察，用手慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦旋鈕，使鏡筒漸漸上升，直到視野內(nèi)的物像清晰為止。此后改用細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕，稍加調(diào)節(jié)焦距，使物像清晰。

3) 微調(diào)移動(dòng)臺(tái)或玻片移動(dòng)器，找到欲觀察的部分。要注意通常顯微鏡視野中的物像為倒像，移動(dòng)玻片時(shí)應(yīng)向相反方向移動(dòng)。

5. 高倍倍觀察。在低倍觀察基礎(chǔ)上，若想增加放大倍數(shù)，可進(jìn)行高倍觀察。方法為：

1) 將欲觀察的部分，移至低倍鏡視野正*，物像要清晰。

2) 旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器，使高倍物鏡移到正確的位置上，隨后稍微調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕，即可使物像清晰。

3) 微調(diào)移動(dòng)臺(tái)或玻片移動(dòng)器，定位欲仔細(xì)觀察的部位。

注意：使用高倍物鏡時(shí)，由于物鏡與標(biāo)本之間距離很近，因此不能動(dòng)粗準(zhǔn)焦旋鈕，只能用細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕。

6. 換片。觀察完畢，如需換用另一玻片標(biāo)片時(shí)，將物鏡轉(zhuǎn)回低倍，取出玻片，再換新片，稍加調(diào)焦，即可觀察。不允許在高倍物鏡下?lián)Q片，以防損壞鏡頭。

顯微鏡使用注意事項(xiàng)

1. 顯微鏡是精密儀器，使用時(shí)必須按照操作規(guī)程，做到細(xì)心和耐心，切勿操之過(guò)急、動(dòng)作過(guò)猛，以防操作失誤而損壞構(gòu)件 ^[2] 。

2. 不要用手觸摸光學(xué)玻璃部分，同時(shí)防止劇烈碰撞而損壞構(gòu)件。

3. 觀察時(shí)一定要加蓋玻片，不能讓玻片上的水流到移動(dòng)臺(tái)上，更不能讓酸、堿及其他化學(xué)藥品接觸顯微鏡，不能讓顯微鏡在陽(yáng)光下曝曬。

4. 使用細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕時(shí)，如遇到不能繼續(xù)向同一方向轉(zhuǎn)動(dòng)而到達(dá)極*，不能蠻擰，應(yīng)向相反方向退轉(zhuǎn)，并轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦旋鈕，然后再用細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕進(jìn)行細(xì)調(diào)。

5. 目鏡或物鏡如有不潔時(shí)，要用專門的鏡紙作直線方向揩拭，切勿用手指或手帕及棉布涂擦。目鏡或物鏡如沾有油污，可先用專門的鏡紙沾少許二甲苯（或無(wú)水乙醇和Diethyl ether1∶1）擦拭干凈，再用干凈擦鏡紙揩拭一遍。