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1)ELISA邊緣效應(yīng)是由溫育形成的。所以溫育一般采用能 使反應(yīng)液溫度迅速達到平衡的水浴法。一種放在水浴箱的隔板上,另一種是放在溫箱的濕盒里。水要浸至板條的1/3處,不可將板條疊加放置。
2)邊緣效應(yīng)(2ng/mlHBsAg一步法三種不同溫育法的結(jié)果)
洗滌
3)ELISA是靠洗滌來達到分離結(jié)合與未結(jié)合抗原抗體復(fù)合物及酶標記物的目的,同時洗滌也可將非特異吸附的蛋白質(zhì)的干擾以及血球、細菌中的酶干擾清除掉。
4)手工洗滌一般采用浸泡方法:
(1)甩去孔內(nèi)反應(yīng)液;
(2)用洗滌液過洗一遍(即注滿孔后即甩去);
(3)微孔重新注滿洗液后浸泡2-3分鐘,間歇搖動;
(4)甩去孔內(nèi)液體,拍板,用紙吸干。
重復(fù)以上操作至少5次。注意各種試劑盒的洗滌液盡量不要混用。
洗板機洗板一定要預(yù)先把板架放平,使洗板機上的每個放液和吸液纖孔都能一致地插入孔底,將孔內(nèi)液體全部吸干,同時要設(shè)置一定的 浸泡時間。如出現(xiàn)機洗后拍板有較多殘留液時應(yīng)再用手工洗2次以上。關(guān)機前要用蒸溜水沖洗管道,避免堵孔。
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