神經干細胞原代培養的取材及步驟,明確體外定向誘導分化條件,為進一步神經干細胞移植相關實驗提供基礎條件.
方法 新生24 h昆明種小鼠無菌條件下冰上取大腦組織,經機械分離加*消化吹打后,加入含有堿性成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子和B27的DMEM/F12培養基中培養;
加入不同濃度胎牛血清誘導其分化,應用免疫熒光技術行巢蛋白、膠質纖維酸性蛋白、微管相關蛋白2染色,對培養細胞鑒定.
結果 新生小鼠提取神經干細胞可形成神經球,并穩定增殖傳代,經誘導可定向分化為神經元及星形膠質細胞.
結論 新生小鼠較胎鼠取材簡單,可培養高質量神經干細胞,血清濃度同向星型膠質細胞方向的分化概率呈正相關.
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