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人elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

來(lái)源:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司   2017年11月22日 15:48  

人elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)方法:
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠IgG單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的IgG與單抗結(jié)合,加入酶標(biāo)抗體,形成免疫復(fù)合物連接在板上,加入酶底物TMB,出現(xiàn)藍(lán)色,加終止液硫酸,顏色變黃,在450nm處測(cè)OD值,IgG濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IgG濃度。
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃反應(yīng)60分鐘。
3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液)100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
人elisa定量檢測(cè)試劑盒Human glucokinase regulatory protein,GKRP ELISA試劑盒    人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human glucokinase,GCK ELISA試劑盒    人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human glucoprotein 130,gp130 ELISA試劑盒     人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISA試劑盒    人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human glucose oxidase,GOD ELISA試劑盒    人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒     規(guī)格:    96T/48T
Human Glucose transporter 1,GLUT1 ELISA試劑盒    人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human Glucose transporter 3,GLUT3 ELISA試劑盒    人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human glucose-6-phosphate isomerase,GPI ELISA試劑盒    人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒     規(guī)格:    96T/48T
Human Glutamate dehydrogenase;GDH/GLDH ELISA試劑盒    人*脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒     規(guī)格:    96T/48T
human glutamic acid decarboxylase autoantibody,GAD-Ab ELISA試劑盒    人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA試劑盒    人*脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human Glutathione peroxidase,GSH-Px ELISA試劑盒    人*過(guò)氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒     規(guī)格:    96T/48T人elisa定量檢測(cè)試劑盒

 

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