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導(dǎo)致ELISA試劑盒測(cè)定過錯(cuò)成果的原因主要有三大要素:標(biāo)本要素;試劑要素;操作要素。
ELISA試劑盒的基本原理使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體外表,并堅(jiān)持其免疫活性;使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原(或抗體),并且此酶標(biāo)抗原(或抗體)既保存其免疫活性,又保存其酶活性;測(cè)守時(shí)將受檢標(biāo)本(抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原(或抗體)按不一樣過程與固相載體外表的抗原或抗體進(jìn)行反響,再用洗刷辦法使固相載體上構(gòu)成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分隔,zui終結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成必定份額;再加入酶反響底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)品,依據(jù)其顏色反響的深淺進(jìn)行定性或定量分析,以了解被測(cè)標(biāo)本中抗體或抗原含量。ELISA辦法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA試劑盒測(cè)定中影響要素較多,并且其操作中有必定的技能請(qǐng)求,在查驗(yàn)中除正常反響外,有時(shí)常可見到一些過錯(cuò)成果(即假陽(yáng)性或假陰性成果)。
血清是zui常用的ELISA標(biāo)本,血漿通常可視為與血清平等的標(biāo)本,標(biāo)本導(dǎo)致的假陽(yáng)性和假陰性成果主要是攪擾性物質(zhì)所造成的,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
1、內(nèi)源性物質(zhì)
有人以為大概40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性攪擾物質(zhì),能夠不一樣程度影響檢查成果。多見的攪擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s)抗體、穿插反響物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
2、ELISA試劑盒外源性物質(zhì)
外源性物質(zhì)常常是因?yàn)橛糜贓LISA測(cè)定的血標(biāo)本的采集、儲(chǔ)存等不妥所造成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲(chǔ)存過久、標(biāo)本凝聚不全和*中添加物等影響。
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