概述

檢驗方法是指實驗室用于實施檢驗檢測工作所依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法和技術(shù)規(guī)范。檢驗方法是實驗室實施檢驗工作的主要依據(jù)，是開展檢驗檢測工作所必須的資源，如果方法及程序不同就會造成結(jié)果不同。

本文主要說明如何對檢驗方法進行確認(rèn)。

<<實驗室資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則>> 條款中規(guī)定：“實驗室應(yīng)確認(rèn)能否正確使用所選用的新方法。如果方法發(fā)生了變化，應(yīng)重新進行確認(rèn)。實驗室應(yīng)確保使用標(biāo)準(zhǔn)的有效版本。”在條款中也有相應(yīng)的規(guī)定。

實驗室采用的檢測方法包括樣品的抽取、處理、運輸、存儲和制備等各個環(huán)節(jié)，確認(rèn)時應(yīng)當(dāng)記錄確認(rèn)所獲得的結(jié)果、使用確認(rèn)的程序、確認(rèn)對方法是否適合于預(yù)期的用途等，必要時還應(yīng)包括不確定度和分析數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)處理技術(shù)。

下面談?wù)劸头椒òl(fā)生了變更時或頒布新標(biāo)準(zhǔn)時，對方法如何進行確認(rèn)：

1.在對外出具數(shù)據(jù)之前應(yīng)確認(rèn)（證實）標(biāo)準(zhǔn)方法已被正確的運用。

2.標(biāo)準(zhǔn)方法發(fā)生了變化應(yīng)重新確認(rèn)。

3.對標(biāo)準(zhǔn)方法定期清理或者查新，以確保有效版本。

一、檢測方法的選擇及使用要求

實驗室資質(zhì)認(rèn)定(或認(rèn)可)現(xiàn)場考核時確定的檢測項目的依據(jù)是國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和地方標(biāo)準(zhǔn)。所以說，當(dāng)沒有、國家、行業(yè)、地方規(guī)定的檢驗方法時，實驗室應(yīng)盡可能選擇已經(jīng)公布或由的技術(shù)組織或有關(guān)科技文獻或雜志上公布的方法，但應(yīng)經(jīng)實驗室技術(shù)主管確認(rèn)。如是在實驗室計量認(rèn)證或認(rèn)可批準(zhǔn)業(yè)務(wù)范圍內(nèi)，因客戶的特殊要求而發(fā)生的情況，其檢驗結(jié)果和報告上應(yīng)有明確的說明。

另外需要使用非標(biāo)準(zhǔn)方法時，這些方法應(yīng)征得委托方同意，并形成有效文件，使出具的報告為委托方和用戶所接受。這是指必須在實驗室計量認(rèn)證或認(rèn)可批準(zhǔn)業(yè)務(wù)范圍內(nèi)使用，所謂有效文件是指甲乙雙方對使用非標(biāo)準(zhǔn)方法檢測達成協(xié)議，一般來說應(yīng)有雙方簽字蓋章，也可以在檢測委托（協(xié)議）書上注明，實驗室在檢測報告中也必需加以說明。  

因此，在檢測方法的選擇上，優(yōu)先使用國家標(biāo)準(zhǔn)，然后是行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)，非標(biāo)準(zhǔn)方法于委托方同意才使用。

對于實驗室完成的每一項或每一系列檢驗的結(jié)果，均應(yīng)按照檢驗方法中的規(guī)定，準(zhǔn)確、清晰、明確、客觀地在檢驗證書或報告中表述，應(yīng)采用法定計量單位。證書或報告中還應(yīng)包括為說明檢驗結(jié)果所必需的各種信息采用方法所要求的全部信息。除上述明確的要求外，檢測報告中必需有檢測數(shù)據(jù)和結(jié)論。

所以說，檢測方法選擇的核心就是方法有效性，要特別注意的是：要使用有效版本的方法。

二、檢測方法的驗證及確認(rèn)

當(dāng)自己的實驗室將標(biāo)準(zhǔn)方法引入到自身的檢測工作時，則應(yīng)對引入的標(biāo)準(zhǔn)方法進行驗證，并正確有效地運用。

方法的確認(rèn)應(yīng)廣泛全面，以滿足預(yù)定用途或應(yīng)用領(lǐng)域的需要。標(biāo)準(zhǔn)方法確認(rèn)準(zhǔn)則是：所用的設(shè)備、環(huán)境條件、人員技術(shù)等。以證明實驗室能夠正確使用該新標(biāo)準(zhǔn)實施檢測過程。

標(biāo)準(zhǔn)方法的確認(rèn)或是通過核查方式，并提供客觀證據(jù)，以證實某一特定預(yù)期用途的特殊要求得到滿足。用于確定某方法性能的技術(shù)宜是下列情況之一,或是其組合:

a.使用參考標(biāo)準(zhǔn)或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考物質(zhì))進行校準(zhǔn);

b.與其他方法所得的結(jié)果進行比較;

c.實驗室間比對;

d.對影響結(jié)果的因素作系統(tǒng)評審;

e.根據(jù)對方法的理論原理和實踐經(jīng)驗的科學(xué)理解，對所得結(jié)果不確定度進行的評定。

實驗室應(yīng)按照制定的相關(guān)工作程序選擇上述方法進行驗證，確認(rèn)將要使用的檢測方法是否滿足要求，在確認(rèn)方法確實可行后，方可投入使用。

對于方法確認(rèn)試驗來說主要有：變更后的標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn)和新方法的確認(rèn)。在確認(rèn)時應(yīng)該做方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線、添加標(biāo)準(zhǔn)回收率試驗、zui低檢出限試驗和精密度試驗等，并考慮方法的特異性和耐用性，如果需要時還應(yīng)進行不確定度評估。應(yīng)用實驗數(shù)據(jù)真實地證明方法的適用性、準(zhǔn)確性和靈敏性。

1、 非標(biāo)方法的確認(rèn)

在<<實驗室資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則>>條款中規(guī)定：實驗室自行制訂的非標(biāo)方法，經(jīng)確認(rèn)后，可以作為資質(zhì)認(rèn)定項目，但特定委托方的檢測。非標(biāo)準(zhǔn)方法是指未經(jīng)相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化組織批準(zhǔn)的檢測/校準(zhǔn)方法。

只有在尚無國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)時，實驗室方可自制非標(biāo)檢測方法，應(yīng)經(jīng)過確認(rèn):

a、從理論到實際對方法的理解；

b、使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或參考標(biāo)準(zhǔn)進行校準(zhǔn)；

c、與不同方法所得的結(jié)果進行比較；

d、實驗室間的比對試驗；

e、結(jié)果不確定度評定。

必要時對方法確認(rèn)過程得到的測量值是否滿足顧客的技術(shù)要求進行評審，這些值可包括：測量結(jié)果的不確定度、檢出限、方法的選擇性、線性、重復(fù)性限、復(fù)現(xiàn)性限、抵抗外來影響的穩(wěn)健性和抵抗來自樣品的基體干擾的交互靈敏度，可根據(jù)具體方法確定。

當(dāng)缺乏信息時，一些指標(biāo)如：準(zhǔn)確度、檢出限、選擇性、線性、重復(fù)性、復(fù)現(xiàn)性、穩(wěn)健度和交互靈敏度等的范圍和不確定度，可以用簡化方式給出。經(jīng)過驗證和確認(rèn)后形成文件，方可依據(jù)該方法檢測（限在特定委托方的檢測），并應(yīng)征得客戶同意。

實驗室應(yīng)使用適當(dāng)?shù)姆椒ê统绦蜻M行所有檢測工作及職責(zé)范圍內(nèi)的其他有關(guān)業(yè)務(wù)活動（包括樣品的抽取、處置、傳送和貯存、制備，測量不確定度的估算，檢驗數(shù)據(jù)的分析）；這些方法和程序應(yīng)與所要求的準(zhǔn)確度有關(guān)檢驗的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范一致。

主要的目的要求是建立符合實際的檢測流程圖，通過流程圖找出關(guān)鍵的要素。不同的檢測對象應(yīng)有不同的檢測流程圖。

2、變更后的標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn)

標(biāo)準(zhǔn)如果一旦變更，就要對照新舊標(biāo)準(zhǔn)的變化情況，對方法涉及的儀器設(shè)備、實驗材料、環(huán)境條件的變化，以及技術(shù)人員的配備是否滿足標(biāo)準(zhǔn)方法要求進行分析，將這些信息反饋給技術(shù)負(fù)責(zé)人，讓技術(shù)負(fù)責(zé)人決策是否提供相關(guān)的資源來適應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)變更后的要求。當(dāng)相關(guān)的資源配備后，實驗室應(yīng)通過做實驗來驗證能夠正確運用變更后的標(biāo)準(zhǔn)方法。這個過程就是標(biāo)準(zhǔn)方法的確認(rèn)。

標(biāo)準(zhǔn)變更的處置：

①. 對于只是標(biāo)準(zhǔn)的代號或年號變更，其檢驗方法、技術(shù)指標(biāo)或參數(shù)沒有變化的原已通過的認(rèn)證項目，只需將標(biāo)準(zhǔn)名稱和代號用文字說明統(tǒng)一匯總后，到許可部門辦理標(biāo)準(zhǔn)變更手續(xù),填寫《計量認(rèn)證檢測標(biāo)準(zhǔn)變更備案審批表》，報實驗室資質(zhì)認(rèn)定部門辦理標(biāo)準(zhǔn)變更手續(xù)。

②. 對于不僅是“標(biāo)準(zhǔn)”年號發(fā)生變化，檢驗方法、技術(shù)指標(biāo)或技術(shù)參數(shù)也隨之提高，實驗室必須配備新的相應(yīng)儀器設(shè)備才能滿足標(biāo)準(zhǔn)要求，或人員須經(jīng)過培訓(xùn)才能操作儀器設(shè)備。屬于檢測性質(zhì)發(fā)生變化，實驗室應(yīng)申請擴項(擴標(biāo)準(zhǔn))評審，接受實驗室資質(zhì)認(rèn)定部門組織的評審，經(jīng)評審組現(xiàn)場確認(rèn)后，由發(fā)證機關(guān)發(fā)放新的項目附表。

如果涉及標(biāo)準(zhǔn)方法換版時，應(yīng)重新對檢測方法進行驗證及確認(rèn)，驗證及確認(rèn)包括以下內(nèi)容：

a、新舊標(biāo)準(zhǔn)的差異分析；

b、執(zhí)行新標(biāo)準(zhǔn)所需人員的評價，必要時進行培訓(xùn)，經(jīng)考核確認(rèn)后*上崗；

c、現(xiàn)有儀器設(shè)備適用性以及校準(zhǔn)方法的評價，必要時補充相應(yīng)儀器設(shè)備或重新校準(zhǔn)；

d、環(huán)境條件的評審，必要時增添設(shè)施；

e、原始記錄表格和報告格式的評審，必要時要進行修訂。

對換版后的標(biāo)準(zhǔn)方法經(jīng)上述各方面驗證及確認(rèn)后，條件均能滿足要求，方可按照該標(biāo)準(zhǔn)方法實施投入檢測使用。

3、新方法的確認(rèn)

凡是未使用過的標(biāo)準(zhǔn)方法對實驗室來說就意味著是新方法，對新方法也都應(yīng)進行確認(rèn)。檢測方法確認(rèn)的技術(shù)要求有如下方法:

①. 回收率試驗

對于食品中的禁用物質(zhì)，回收率應(yīng)在方法的測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限進行三水平試驗;對于已制定zui高殘留量(MRL)的，回收率應(yīng)在方法測定低限、MRL、選一適合點進行三水平試驗:對于未制定MRL的，回收率應(yīng)在方法測定低限、常見*，選一適合點進行三水平試驗。回收率的參考范圍見表1。

②.校準(zhǔn)曲線

應(yīng)描述校準(zhǔn)曲線的數(shù)學(xué)方程式以及校準(zhǔn)曲線的工作范圍，濃度范圍盡可能覆蓋一個數(shù)量級，至少作5個檢測點(不包括空白)。對于篩選方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)(r )不應(yīng)壓于0.98，對于驗證方法，相關(guān)系數(shù)(r )不應(yīng)低于0.99。測試溶液中被測組分濃度應(yīng)在校準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)。

③.精密度試驗

對于食品中的禁用物質(zhì)，精密度實驗應(yīng)在方法測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限三水平進行:對于需制定MRL的，精密度試驗應(yīng)在方法測定低限、常見*、選一適合點三水平進行。重復(fù)測定次數(shù)至少為6次。實驗室內(nèi)部的變異系數(shù)參考范圍見表2。

④.測定低限

方法的測定低限按下式計算: 

CL =3Sb/b 

式中: CL一一方法的測定低限;

Sb一一空白值標(biāo)準(zhǔn)偏差(一般平行測定20次得到); 

b一一方法校準(zhǔn)曲線的斜率。 

對于已制定MRL的物質(zhì)，方法測定低限加上樣品在MRL處的標(biāo)準(zhǔn)偏差的三倍，應(yīng)超過MRL值。對于禁用物質(zhì)，方法測定低限應(yīng)盡可能低。

（也可采用標(biāo)準(zhǔn)加入試驗法確定。）

⑤.準(zhǔn)確度

重復(fù)分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（實物標(biāo)樣）或水平測試樣品，測定含量（經(jīng)回收率校正后），得出平均值與真值的偏差（變異系數(shù)）。指導(dǎo)范圍見表3。

⑥.提取效率

提取效率可用以下方法進行試驗:

a、用陽性的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和水平測試的陽性樣品進行試驗；

b、陽性樣品用桶—溶劑反復(fù)提取，觀察被分析物的濃度變化；

c、用不同提取技術(shù)或不同提取溶劑進行比較。 

三、標(biāo)準(zhǔn)的查新和受控使用

對實驗室使用的標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)定期進行清理和查新，實驗室應(yīng)確保使用的標(biāo)準(zhǔn)為有效版本。可通過網(wǎng)絡(luò)查詢在用標(biāo)準(zhǔn)的現(xiàn)行有效性，查新方式：

①向標(biāo)準(zhǔn)情報部門查詢 ；

②訂購機構(gòu)出版的國家標(biāo)準(zhǔn)和計量技術(shù)法規(guī)目錄；

③從期刊獲取信息 ；

④應(yīng)用互聯(lián)網(wǎng)查詢 ；

⑤參加技術(shù)交流會。

與實驗室工作有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)、手冊、指導(dǎo)書等都應(yīng)現(xiàn)行有效并便于工作人員使用。對于現(xiàn)行有效的標(biāo)準(zhǔn)版本要受控發(fā)放，對于已作廢的標(biāo)準(zhǔn)，要加蓋作廢標(biāo)識并撤離實驗場所，以免誤用。

在標(biāo)準(zhǔn)文件查新、更新工作中，各相關(guān)部門要配合和協(xié)助質(zhì)量管理部門跟蹤查新、更新工作，質(zhì)量管理部門要定期發(fā)放更新信息，并將查新內(nèi)容匯總及做好保留查新、更新工作記錄。

（內(nèi)容來源衡天力儀器網(wǎng)）