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相信一些童鞋在拿到cck-8檢測試劑盒做cck-8細(xì)胞增殖檢測實(shí)驗(yàn),都會(huì)碰到一些實(shí)驗(yàn)的問題,比如是1.在96 孔板中細(xì)胞鋪板總是不均勻 ,聚堆怎樣才能解決呢?2.在做加藥實(shí)驗(yàn)時(shí),藥物對(duì)測定是否有影響?如何解決?3.在實(shí)驗(yàn)中吸光度值太高,如果不能減少細(xì)胞數(shù)量,如何解決?下面我們就為大家一一解答。
在做加藥實(shí)驗(yàn)時(shí),藥物對(duì)測定有時(shí)會(huì)有影響。如果藥物具有還原性,會(huì)和CCK8發(fā)生顯色反應(yīng),增加吸光度。解決辦法:首先要確認(rèn)藥物是否有吸收,在含有藥物的培養(yǎng)基中加入CCK8,測定450 nm的吸光度,如果它的吸光度比不含藥物的培養(yǎng)基 (加CCK8)的吸光度高,則證明藥物有影響,可在加CCK8之前更換培養(yǎng)基,去掉藥物的影響。
在實(shí)驗(yàn)中吸光度值太高,如果不能減少細(xì)胞數(shù)量,可以縮短加入CCK8后的培養(yǎng)時(shí)間。例如:可以把加入CCK8試劑后的培養(yǎng)時(shí)間由2小時(shí)縮短為1小時(shí)。
CCK-8檢測試劑盒作為為何是好的選擇對(duì)細(xì)胞增殖和毒性檢測
· 如下表,CCK-8法與其他細(xì)胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢(shì)比較,結(jié)果不言而喻!
檢測方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK-8法 | |||||
甲臜產(chǎn)物的水溶性 | 差(需加有機(jī)溶劑溶解后再檢測) | 好 | 好 | 好 | |||||
產(chǎn)品性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 | |||||
使用方法 | 配成溶液后使用 | 現(xiàn)配現(xiàn)用 | 即開即用 | 即開即用 | |||||
檢測靈敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 | |||||
檢測時(shí)間 | 較長 | 較短 | 較短 | zui短 | |||||
檢測波長 | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm | |||||
細(xì)胞毒性 | 高,細(xì)胞形態(tài)*消失 | 很低,細(xì)胞形態(tài)不變 | 很低,細(xì)胞形態(tài)不變 | 很低,細(xì)胞形態(tài)不變 | |||||
試劑穩(wěn)定性 | 一般 | 較差 | 一般 | 很好 | |||||
批量樣品檢測 | 可以 | 非常適合 | 非常適合 | 非常適合 | |||||
便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
* 細(xì)胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到佳測定時(shí)間
* 酚紅和血清對(duì)CCK法的檢測不會(huì)造成干擾(扣除空白孔即可)
如何選擇合適的CCK-8檢測試劑盒?
目前市面上能提供的【CCK-8】細(xì)胞增殖/毒性檢測試劑盒有國產(chǎn)分裝或原產(chǎn)的,國產(chǎn)分裝的CCK-8試劑盒在質(zhì)量穩(wěn)定性上有不足。而原產(chǎn)于國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室的CCK-8試劑盒有些具有較好的檢測結(jié)果,在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制。至于*供應(yīng)CCK-8試劑盒的進(jìn)口品牌并不多,就連Abcam、Thermo,Sigma等等幾個(gè)品牌都不能夠提供CCK-8試劑盒,而其它品牌在性價(jià)比上遠(yuǎn)遜于Abbkine產(chǎn)品。
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