第四儀器公司對分子發光分析法的講解

1. 熒光和磷光的產生：具有不飽和基團的基態分子受光照后，價電子躍遷產生熒光和磷光。

2. 激發光譜和發射光譜：

激發光譜：將激發光的光源用單色器分光，測定不同波長照射下所發射的熒光強度（F），以F做縱坐標，激發光波長λ做橫坐標作圖。激發光譜反映了激發光波長與熒光強度之間的關系。

發射光譜：固定激發光波長，讓物質發射的熒光通過單色器，測定不同波長的熒光強度，以熒光強度F做縱坐標，熒光波長λ做橫坐標作圖。熒光光譜反映了發射的熒光波長與熒光強度的關系。

3. 熒光和分子結構的關系

發射熒光的物質應同時具備以下兩個條件：

物質分子必須具有能夠吸收紫外或可見光的結構，并且能產生π→π* 或 n→π* 躍遷。

熒光物質必須有較大的熒光量子產率。

（1）躍遷類型：π→π*較n→π*躍遷的熒光效率高。

（2）共軛結構：凡是能提高π電子共軛度的結構，都會增大熒光強度，并使熒光光譜長移。

（3）剛性平面：分子的剛性及共平面性越大，熒光量子產率就越大。

（4）取代基效應：在芳香化合物的芳香環上，給電子基團增強熒光，吸電子基團減弱熒光。

一、熒光分析法的特點

優點：靈敏度高（提高激發光強度，可提高熒光強度），達ng/ml；選擇性強（比較容易排除其它物質的干擾），重現性好；取樣少。

缺點：許多物質本身不能發射熒光，因此，應用不夠廣泛。

二、熒光分析法與UV-Vis法的比較

相同點：都需要吸收紫外-可見光，產生電子能級躍遷。

不同點：

熒光法測定的是物質經紫外-可見光照射后發射出的熒光的強度 (F);

UV-Vis法測定的是物質對紫外-可見光的吸收程度 (A) ;

熒光法定量測定的靈敏度比UV-Vis法高。

三、名詞解釋：

單重態：當基態分子的電子都配對時，S = 0，多重性 M=1，這樣的電子能態稱為單重態。

單重電子激發態：當基態分子的成對電子吸收光能之后，被激發到某一激發態上。如果它的自旋方向不變，S=0，M=1，這時的激發態叫單重電子激發態。

三重態：若通過分子內部的一些能量轉移，或能階間的跨越，成對電子中的一個電子自旋方向倒轉，使兩個電子自旋方向相同而不配對，這時S=1，M=3，這種電子激發態稱三重電子激發態（三重態）

系間跨越：指的是不同多重度狀態間的一種*躍遷過程。

振動弛豫：

內轉換：指的是相同多重度等能態間的一種*躍遷過程。

量子產率：也稱熒光效率或量子效率，其值在0~1之間，它表示物質發射熒光的能力。

熒光猝滅：指熒光物質分子與溶劑分子或其他溶質分子相互作用引起熒光強度降低或熒光強度與濃度不呈線性關系的現象。

重原子效應：